第四節(jié) 地西泮和氯氮卓的分析

　　苯駢二氮雜卓類藥物為含氮雜原子、六元和七元環(huán)并合而成的有機化合物，本類藥物結(jié)構(gòu)中，二氮雜卓七元環(huán)上氮原子具有強的堿性，結(jié)構(gòu)中的環(huán)在強酸性溶液中可水解，形 成相應的二苯甲酮衍生物，其水解產(chǎn)物所呈現(xiàn)的某些特性也可供鑒別或含量測定之用。

　　一、鑒別

　　(一) 地西泮

　　1.硫酸-熒光反應 苯駢二氮雜卓類藥物溶于硫酸后，在紫外光(365nm)下，呈現(xiàn)不同顏色的熒光。地西泮為黃綠色。

　　2.氯元素反應 本藥物為有機氯化合物，用氧瓶燃燒法破壞，生成氯化氫，以5%氫氧化鈉溶液吸收，加硝酸酸化，顯氯化物反應。

　　3. 紫外和紅外吸收光譜

　　(二) 氯氮卓

　　1.水解后重氮化-偶合反應 氯氮卓的鹽酸溶液，緩緩加熱煮沸，水解生成二苯甲酮衍生物，具有芳伯氨基。加亞硝酸鈉和堿性β-萘酚試液，生成橙紅沉淀。

　　2.沉淀反應 加碘化鉍鉀產(chǎn)生橙色沉淀。

　　3.紫外光譜

　　二、有關物質(zhì)檢查

　　地西泮在生產(chǎn)工藝過程或貯藏期間出現(xiàn)分解，產(chǎn)生2-甲氨基-5-氯二苯酮雜質(zhì)。

　　藥典采用高低濃度對比法檢查地西泮原料藥和片劑中有關物質(zhì)。

　　地西泮注射劑采用HPLC法測定含量，所以在含量測定條件下，采用主成分自身對照法檢查分解產(chǎn)物。

　　三、含量測定

　　(一) 非水溶液滴定法 ：本法基于該類藥物結(jié)構(gòu)中，二氮雜卓七元雜環(huán)上氮原子的弱堿性，可用非水溶液滴定法測定其含量。由于該類藥物的堿性強弱和存在狀態(tài)不同，測定時所采用的溶劑、指示劑及指示終點的方法也不盡相同。

　　(二) 紫外分光光度法 ：藥物的片劑或片劑均勻度與溶出度的測定均采用此法。

　　(三) 高效液相色譜法

　　我國藥典：地西泮注射液。地西泮注射液曾用萃取后分光光度法測定含量，因苯甲酸、苯甲酸鈉等附加劑有干擾，故新版藥典改用HPLC法。此法操作簡便、可消除干擾。

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水(70：30)為流動相;檢測波長為254nm。理論板數(shù)按地西泮峰計算應不低于1500，地西泮峰和內(nèi)標物質(zhì)峰的分離度應大于1.5。

　　本法為反相HPLC法，以萘為內(nèi)標，用內(nèi)標法加校正因子測定含量。