第十六單元 動物源性細菌

　　動物源性細菌是人畜共患病的病原菌，即由一種病原菌同時可引起動物和人類的某些傳染病，稱為人畜(獸)共患病，其中絕大多數(shù)是以動物作為傳染源的稱為動物源性疾病(zoonosis)。由于人類直接接觸病畜或其污染物及媒介動物叮咬等途徑感染而致病，這些病主要發(fā)生在畜牧區(qū)或自然疫源地。動物源性細菌主要有布魯菌、鼠疫耶氏菌和炭疽芽胞桿菌。

　　第一節(jié) 布魯菌屬

　　布魯 菌屬(Brucella)細菌是一類人畜共患傳染病的病原菌，有4個生物種、13個生物型，因最早由美國醫(yī)師 David Bruce首先分離出，故得名。本屬使人致病的有牛布魯菌 (B.abortus又稱流產(chǎn)布魯菌)、羊布魯桿菌(B.melitensis)、豬布魯桿菌(B.suis)和犬布魯桿菌(B.canis)，在我國流行占絕對優(yōu)勢的是羊布魯菌病，其次為牛布魯菌病。

　　一、 生物學性狀

　　形態(tài)與染色

　　革蘭陰性小球桿菌或短桿菌。大小為0.4~0.8mm ×0.5~1.5mm。無芽胞，無鞭毛，光滑型菌有微莢膜。革蘭染色經(jīng)常著色不佳，故復染時間應適當延長至3min左右。

　　培養(yǎng)特性

　　需氧菌，牛布魯菌在初分離時需5%~10%CO2。營養(yǎng)要求較高，在普通培養(yǎng)基上生長緩慢，如加入血清或肝侵液，或加硫胺、煙酸和生長素等可促進生長。最適生長溫度為35~37℃，最適pH為6.6~6.8。經(jīng)37℃ 培養(yǎng)48h可長出微小、透明、無色的光滑型(S)菌落，經(jīng)人工傳代培養(yǎng)后可轉(zhuǎn)變成粗糙型(R)菌落。兩種菌落可用吖啶黃玻片凝聚試驗鑒別，S型在1:1000的吖啶黃中呈均勻混濁，而R型菌出現(xiàn)凝塊。布魯菌在血瓊脂平板上不溶血，在液體培養(yǎng)基中可形成輕度混濁并有沉淀。

　　生化反應

　　大多能分解尿素和產(chǎn)生H2S。根據(jù)產(chǎn)生H2S的多少和在含堿性染料培養(yǎng)基中的生長情況，可鑒別羊、牛、豬等三種布魯菌。

　　抗原構造與分型

　　布魯菌含有兩種抗原物質(zhì)，即A抗原和M抗原。兩種抗原在不同的布魯菌中含量不同，牛布魯菌含A(abortus)抗原多，故又稱牛布魯菌抗原;羊布魯菌含M(melitensis)抗原多故又稱羊布魯菌抗原。兩種抗原量的比例不同可對菌種進行區(qū)別，如牛布魯菌A:M=20:1，而羊布魯菌A:M=1:20，豬布魯菌A:M=2:1。用A與M因子血清進行凝集試驗可鑒別三種布魯菌。

　　抵抗力

　　抵抗力較強，在土壤、毛皮、病畜的臟器和分泌物、肉和乳制品中可生存數(shù)周至數(shù)月。但在濕熱60℃、20min，日光直接照射下20min可死亡;對常用消毒劑均較敏感，如3%來蘇作用數(shù)分鐘可殺死。對常用的廣譜抗生素也較敏感。

　　二 、 致病性與免疫性

　　致病物質(zhì)

　　布魯菌的主要致病物質(zhì)是內(nèi)毒素。莢膜與侵襲酶(透明質(zhì)酸酶、過氧化氫酶等)增強了該菌的侵襲力，使細菌能通過完整皮膚、粘膜進入宿主體內(nèi)，并在機體臟器內(nèi)大量繁殖和快速擴散入血流。

　　所致疾病

　　布魯菌感染家畜引起母畜流產(chǎn)，病原體可隨流產(chǎn)的胎畜和羊水大量排出;病畜還可表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、乳腺炎、子宮炎等，隱性感染的動物也可經(jīng)乳汁、糞、尿等長期排菌，人類對布魯菌易感，主要通過接觸病畜及其分泌物或接觸被污染的畜產(chǎn)品，經(jīng)皮膚、粘膜、眼結膜、消化道、呼吸道等不同途徑感染。

　　布魯菌侵入機體經(jīng)1~6周的潛伏期，此期細菌被中性粒細胞和巨噬細胞吞噬，成為胞內(nèi)寄生菌，隨淋巴流達局部淋巴結生長繁殖形成感染灶。當細菌繁殖達一定數(shù)量，突破淋巴結而侵入血流，出現(xiàn)菌血癥。由于內(nèi)毒素的作用致患者發(fā)熱，隨后細菌進入肝、脾、骨髓和淋巴結等臟器細胞，發(fā)熱也漸消退。細菌在細胞內(nèi)繁殖到一定程度可再度入血，又出現(xiàn)菌血癥而致體溫升高。如此反復形成的菌血癥，使患者的熱型呈波浪式，臨床上稱為波浪熱。感染易轉(zhuǎn)為慢性，在全身各處引起遷徙性病變，伴隨發(fā)熱、關節(jié)痛和全身乏力等癥狀，體征有肝、脾腫大。

　　人類感染布魯菌不引起流產(chǎn)，原因可能是易感動物的生殖器官和胎膜上含有大量赤蘚醇，刺激細菌生長而引起流產(chǎn)，而人類胎盤中不含有赤蘚醇，故不會引起流產(chǎn)。另外，布魯菌的致病與本菌引起的Ⅳ型超敏反應有關;還有菌體抗原成分與相應抗體形成的免疫復合物，可導致急性炎癥和壞死，病灶中有大量中性粒細胞浸潤，可能是一種Ⅲ型超敏反應(Arthus反應)。

　　免疫性

　　機體感染布魯菌后可產(chǎn)生免疫力，且各菌種和生物型之間有交叉免疫。一般認為此免疫力是有菌免疫，即當機體內(nèi)有布魯菌存在時，對再次感染則有較強免疫力。但近來認為隨著病程的延續(xù)，機體免疫力不斷增強，病菌不斷被消滅，最終可變?yōu)闊o菌免疫。由于布魯菌為細胞內(nèi)寄生，故其免疫以細胞免疫為主。病后機體產(chǎn)IgM和IgG型抗體，可發(fā)揮免疫調(diào)理作用。此外，細胞免疫和Ⅳ型超敏反應所導致的免疫保護及病理損害，在慢性與反復發(fā)作的病程中往往交織存在。

　　三 、 微生物學檢查

　　標本

　　血液是最常用的標本，急性期血培養(yǎng)陽性率高達70%。骨髓在急性期、亞急性期病人均可分離陽性。病畜的子宮分泌物、羊水，流產(chǎn)動物的肝、脾、骨髓等也可作為分離培養(yǎng)的標本。

　　分離培養(yǎng)與鑒定

　　將標本接種于雙相肝浸液培養(yǎng)基(液相為肝浸液的瓊脂斜面)置37℃、5%~10%CO2孵箱中培養(yǎng)。菌落大多在4~7d形成，若30d時仍無菌生長可報告為陰性。若有菌生長，可根據(jù)涂片染色鏡檢，CO2的要求，H2S產(chǎn)生，染料抑菌試驗，玻片凝集等確定型別。

　　血清學試驗

　　1.凝集試驗：發(fā)病1~7d后血清中開始出出現(xiàn)IgM抗體，將患者血清作倍比稀釋，標準菌量為1×109個/ml，進行玻片凝集試驗，1:200有診斷意義。但當效價≥1:100時應重復進行試管凝集試驗，需要在37℃水浴16~20d后觀察結果，以1:200~1:400血清凝集者為陽性。用膠乳凝集試驗可在6min內(nèi)判定結果，方法簡易可靠。

　　2.抗球蛋白試驗(Coomb試驗)：布魯菌感染患者常出現(xiàn)不完全抗體，需用Coomb試驗才能檢出。在病程中凝集效價出現(xiàn)增長者有診斷意義。

　　3.補體結合試驗：一般發(fā)病3周后出現(xiàn)IgG抗體，由于此抗體能維持較長時間，故對診斷慢性布魯菌病意義較大。此試驗特異性高，試驗結果以1:10為陽性。

　　皮膚試驗

　　取布魯菌素(brucellin)或布魯菌蛋白提取物0.1ml作皮內(nèi)注射，24~48d后觀察結果.局部紅腫浸潤直徑1~2cm者為弱陽性，>2~3cm為陽性，>3~6cm為強陽性。若紅腫在4~6d內(nèi)消退者為假陽性。皮試陽性可診斷慢性或曾患過布魯菌病。

　　四、防治原則

　　控制和消滅家畜布魯菌病，切斷傳播途徑和免疫接種是三項主要的預防措施。免疫接種以畜群為主，疫區(qū)人群也應接種減毒活疫苗(104M株疫苗皮上劃痕接種)，有效期約一年。急性病人用抗生素治療，慢性者除繼續(xù)用抗生素治療外，應采用綜合療法以增強機體免疫力，也可用特異性疫苗進行脫敏治療。