第二節(jié) 耶爾森菌屬

　　耶爾森菌屬(Yersinia)細(xì)菌屬于腸桿菌科，是一類革蘭陰性小桿菌。包括11個菌種，其中鼠疫耶氏菌、小腸結(jié)腸炎耶氏菌與假結(jié)核耶氏菌等三種肯定是人類致病菌。本屬細(xì)菌通常先引起嚙齒動物、家畜和鳥類等動物感染，人類通過接觸動物、被節(jié)肢動物叮咬或食入污染食物等途徑感染。

　　一 鼠疫耶 氏菌

　　鼠疫耶氏菌(Y.pestis)俗稱鼠疫桿菌，是鼠疫的病原菌。鼠疫是一種自然疫源性的烈性傳染病，歷史上曾發(fā)生過三次世界性大流行。人類鼠疫是被疫鼠的鼠蚤叮咬而受染，1989~1998年世界各地報(bào)告鼠疫病例共5440余例，死亡681人，病死率11%。因此，鼠疫依然威脅著人類。

　　(一)生物學(xué)性狀

　　形態(tài)與染色

　　為形兩端濃染的卵圓短桿菌。大小為0.5~0.8 ×1~2mm。一般單個散在，偶爾成雙或呈短鏈。有莢膜，無鞭毛，無芽胞。革蘭染色陰性。從死于鼠疫的尸體或動物新鮮內(nèi)臟制備的印片或涂片，形態(tài)典型，有時(shí)可見到吞噬細(xì)胞內(nèi)外均有本菌。但在化膿或潰瘍性病灶及腐敗材料中可見菌體膨大成球形，且著色不佳。如在陳舊培養(yǎng)物或生長在含高鹽(30g/L NaCl)的培養(yǎng)基上則呈多形態(tài)性，有球形、桿形、棒形和啞鈴狀等，亦可見到著色極淺的細(xì)菌輪廓，稱菌影(ghost)。

　　培養(yǎng)特性

　　兼性厭氧，最適生長溫度為27~30℃，最適pH為6.9~7.2。在普通培養(yǎng)基上能生長，但生長緩慢。在含血液或組織液的培養(yǎng)基上生長， 24~48h可形成柔軟、粘稠的粗糙型菌落。在肉湯培養(yǎng)基中開始呈混濁，24h后表現(xiàn)為沉淀生長，48h后逐漸形成菌膜，稍加搖動菌膜呈“鐘乳石”狀下沉，此特征有一定鑒別意義。

　　抗原結(jié)構(gòu)

　　鼠疫耶氏菌的抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜，至少有18種抗原，重要的有F1、V-W、外膜蛋白和MT等四種抗原。

　　1.F1(fraction 1)抗原

　　是鼠疫耶氏菌的莢膜抗原，于37℃時(shí)產(chǎn)生，具有抗吞噬和活化補(bǔ)體的作用。F1的抗原性強(qiáng)，特異性高，其相應(yīng)抗體具有免疫保護(hù)作用。但F1抗原是一種不耐熱的糖蛋白，100℃15min即失去抗原性。

　　2.V和W抗原

　　系毒力質(zhì)粒DNA編碼。W抗原位于菌體表面，是一種脂蛋白;V抗原存在于細(xì)胞質(zhì)中，為可溶性蛋白。兩種抗原總是一起產(chǎn)生，與細(xì)菌毒力有關(guān)，使細(xì)菌具有形成肉芽腫損傷和在細(xì)胞內(nèi)存活的能力，且有免疫抑制作用。

　　3.外膜蛋白(Yersinia outer membrane proteins,Yop)

　　其編碼基因與V-W基因存在于同一質(zhì)粒上，在37℃和含Ca2+條件下能產(chǎn)生數(shù)種外膜蛋白，這些蛋白能使細(xì)菌在突破宿主的防御機(jī)制，導(dǎo)致機(jī)體發(fā)病等方面具有重要作用。

　　4.鼠毒素(murine toxin,MT)

　　為可溶性蛋白，是一種外毒素，對鼠類有劇烈毒性，1mg即可使鼠致死，它可阻斷動物b腎上腺能神經(jīng)和引起心臟損害，但對人的損傷作用尚不清楚。MT具有良好的抗原性，用0.2%甲醛處理可使其脫毒制成類毒素，用于免疫動物制備抗毒素。

　　5.內(nèi)毒素

　　其性質(zhì)與腸道桿菌內(nèi)毒素相似，可致機(jī)體發(fā)熱，產(chǎn)生休克和DIC等。

　　抵抗力

　　對理化因素抵抗力較弱。濕熱70~80℃10min或100℃1min死亡，5%來蘇或5%石炭酸20min內(nèi)可將痰液中病菌殺死，但在自然環(huán)境中的痰液中能存活36d，在蚤糞和土壤中能存活1年左右。

　　變異性

　　鼠疫耶氏菌通過自發(fā)或誘發(fā)性突變、轉(zhuǎn)座子移位及基因轉(zhuǎn)移等機(jī)制發(fā)生變異，其生化特性、毒力、耐藥性和抗原構(gòu)造等均可出現(xiàn)變異菌株。與多數(shù)腸道菌光滑(S)型菌落致病性強(qiáng)的特征不同，野生菌株的菌落呈粗糙(R)型。經(jīng)人工傳代培養(yǎng)后菌落逐漸變?yōu)镾型，其毒力也隨之減弱。

　　(二)致病性與免疫性

　　致病物質(zhì)

　　鼠毒素主要對鼠類致病，具外毒素性質(zhì)，但只有當(dāng)細(xì)菌自溶裂解后才釋放。鼠疫耶氏菌的毒力很強(qiáng)，少數(shù)幾個細(xì)菌即可使人致病，其致病性主要與F1抗原、V-W抗原、外膜抗原及內(nèi)毒素等相關(guān)。

　　所致疾病

　　鼠疫是自然疫源性傳染病，一般先在鼠類間發(fā)病和流行，通過鼠蚤的叮咬而傳染人類，尤其當(dāng)大批病鼠死亡后，失去宿主的鼠蚤轉(zhuǎn)向人群。人患鼠疫后，又可通過人蚤或呼吸道等途徑在人群間流行。臨床常見有腺型、肺型和敗血癥型鼠疫。

　　鼠疫耶氏菌侵入人體，被吞噬細(xì)胞吞噬后能在細(xì)胞內(nèi)生長繁殖，并沿淋巴流到達(dá)局部淋巴結(jié)，引起嚴(yán)重的淋巴結(jié)炎。犯及的淋巴結(jié)多在腹股溝，一般為單側(cè)，并引起腫脹、出血和壞死，稱為腺鼠疫。如吸入染菌的塵埃則引起原發(fā)性肺鼠疫，也可由腺型或敗血癥型鼠疫蔓延而致繼發(fā)性肺鼠疫。病人高熱寒戰(zhàn)，咳嗽、胸痛、喀血、呼吸困難，全身衰竭而出現(xiàn)嚴(yán)重中毒癥狀，多于2~4d內(nèi)死亡。病人死亡后皮膚常呈黑紫色，故有“黑死病”之稱。重癥腺型或肺型鼠疫患者的病原菌可侵入血流，導(dǎo)致敗血癥型鼠疫，體溫升高至39~40℃，發(fā)生休克和DIC，皮膚粘膜見出血點(diǎn)及淤斑，常并發(fā)支氣管肺炎和腦膜炎等癥狀，多迅速惡化而死亡。

　　免疫性

　　鼠疫感染后能獲得牢固免疫力，再次感染罕見。主要產(chǎn)生針對F1抗原、V-W抗原的抗體等，具有調(diào)理促吞噬、凝集細(xì)菌及殺菌等作用。另外，尚依賴于吞噬細(xì)胞吞殺細(xì)菌等細(xì)胞免疫的作用。

　　(三) 微生物學(xué)檢查

　　標(biāo)本

　　按不同病型采取淋巴結(jié)穿刺液、痰、血液等。人或動物尸體取肝、脾、肺、腫大淋巴結(jié)和心血等。陳舊尸體取骨髓。因鼠疫為法定甲類烈性傳染病，其傳染性極強(qiáng)，除標(biāo)本采取時(shí)要嚴(yán)格無菌操作和控制外，標(biāo)本必須送指定的具有嚴(yán)格防護(hù)措施的專門實(shí)驗(yàn)室，并按嚴(yán)格操作規(guī)程進(jìn)行。

　　直接涂片鏡檢

　　檢材直接涂片或印片，分別進(jìn)行革蘭染色和美藍(lán)染色，鏡檢觀察典型形態(tài)與染色性。免疫熒光試驗(yàn)用于快速診斷。

　　分離培養(yǎng)與鑒定

　　將檢材接種于血瓊脂平板或0.025%亞硫酸鈉瓊脂平板等，經(jīng)24h孵育后形成針尖樣小菌落，經(jīng)48h后才形成1~1.5mm灰白色較粘稠的粗糙型菌落。在液體培養(yǎng)基中孵育48h可形成“鐘乳石”現(xiàn)象。當(dāng)分離出可疑菌落時(shí)，可作涂片鏡檢，噬菌體裂解試驗(yàn)，血清凝集試驗(yàn)等進(jìn)一步鑒定。

　　(四) 防治原則

　　滅鼠滅蚤是切斷鼠疫傳播環(huán)節(jié)，消滅鼠疫源的根本措施。我國目前應(yīng)用EV無毒株生產(chǎn)活菌疫苗，多用皮下、皮內(nèi)接種或皮上劃痕，免疫力可維持8~10個月。此外，應(yīng)加強(qiáng)國境、海關(guān)檢疫。

　　治療必須早期足量用藥，采用磺胺類、鏈霉素、氯霉素、氨基糖苷類抗生素等均有效。

　　二、 小腸結(jié)腸炎耶氏菌

　　小腸結(jié)腸炎耶氏菌(Y.enterocolitica)是引起人類嚴(yán)重的小腸結(jié)腸炎的病原菌。本菌天然集居在多種動物體內(nèi)，如鼠、兔、豬等，通過污染食物(牛奶、肉類等)和水，經(jīng)糞口途徑感染或因接觸染疫動物而感染。近年來本菌中某些血清型引起的腸道感染正逐漸上升。

　　(一) 生物學(xué)性狀

　　形態(tài)與染色

　　革蘭陰性球桿菌，偶見兩端濃染。無芽胞、無莢膜，25℃培養(yǎng)時(shí)有周身鞭毛，但37℃培養(yǎng)時(shí)則很少或無鞭毛。

　　培養(yǎng)特性

　　兼性厭氧。耐低溫，在4℃能生長，但最適溫度為20~

　　28℃，最適pH7.6。在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長良好。某些菌株在血瓊脂平板上可出現(xiàn)溶血環(huán)，在腸道菌選擇培養(yǎng)基上形成不發(fā)酵乳糖的無色半透明、扁平的小菌落。

　　血清型

　　根據(jù)菌體O抗原可分為50多種血清型，但僅幾種血清型與致病有關(guān)，且致病型別各地區(qū)也不同。我國主要為O:9、O:8、O:5和O:3等。此外有毒力菌株大都具有V和W抗原、外毒素蛋白等。

　　(二) 致病性

　　致病物質(zhì)

　　本菌為一種腸道致病菌，具有侵襲性及產(chǎn)毒素性。V-W抗原具有抗吞噬作用。O:3、O:8、O:9等菌株產(chǎn)生耐熱性腸毒素，與大腸埃希菌腸毒素ST相似。另外，某些菌株的O抗原與人體組織有共同抗原，可刺激機(jī)體產(chǎn)生自身抗體，引起自身免疫性疾病。

　　所致疾病

　　本菌為人畜共患病原菌。人類通過食用污染的食物和水而受染，潛伏期3~7d，臨床表現(xiàn)以小腸、結(jié)腸炎為多見，也見有敗血癥者。臨床上可出現(xiàn)發(fā)熱，腹瀉為粘液或水樣便，易與志賀菌痢混淆。根據(jù)病變位置與發(fā)病機(jī)制不同，可將小腸結(jié)腸炎分為四型：①胃腸炎(或小腸結(jié)腸炎)型;②回腸末端炎、闌尾炎和腸系膜淋巴結(jié)炎型;③結(jié)節(jié)性紅斑與關(guān)節(jié)炎型(自身免疫病);④敗血癥型。

　　(三) 微生物學(xué)檢查

　　標(biāo)本取糞便、血液和剩余食物等，根據(jù)該菌嗜冷特性，將標(biāo)本置pH 7.4~7.8的磷酸鹽緩沖鹽水中,于4℃增菌2～3w;再用耶氏菌專用選擇培養(yǎng)基置25℃培養(yǎng)24~48h，挑取可疑菌落進(jìn)行鑒定。主要鑒定依據(jù)為25℃培養(yǎng)時(shí)動力陽性，嗜冷性、脲酶陽性、H2S陽性及血清學(xué)鑒定等。

　　三 、 假結(jié)核耶氏菌

　　假結(jié)核耶氏菌(Y.pseudotuberculosis)存在于多種動物的腸道中,人類感染較少，主要通過食用患病動物污染的食物而感染。由于該菌在動物感染的臟器中形成粟粒狀結(jié)核結(jié)節(jié)，在人的感染部位形成結(jié)核樣肉芽腫，故稱假結(jié)核耶氏菌。

　　本菌具多形態(tài)性，呈球狀或短桿狀。革蘭陰性。無莢膜、無芽胞，在病變組織中菌體兩端濃染。需氧或兼性厭氧，最適生長溫度為25℃，且出現(xiàn)動力，37℃培養(yǎng)動力消失。本菌的生化反應(yīng)與鼠疫耶氏菌相似，引起的疾病與小腸結(jié)腸炎耶氏菌相似。根據(jù)耐熱的菌體O抗原將細(xì)菌分為6個血清型，引起人類感染的主要是O1血清型。毒力菌株大部分具有V和W抗原。

　　假結(jié)核耶氏菌對豚鼠、家兔、鼠類等有很強(qiáng)的致病性，患病動物的肝、脾、肺和淋巴結(jié)等可形成多發(fā)性粟粒狀結(jié)核結(jié)節(jié)。人類感染多為胃腸炎，腸系膜淋巴結(jié)肉芽腫，回腸末端炎等，后者的癥狀與闌尾炎相似，多發(fā)生于5~15歲的學(xué)齡兒童，并易發(fā)展為敗血癥。少數(shù)表現(xiàn)為高熱、紫癜，并伴有肝、脾腫大，類似腸傷寒的癥狀。并有呈結(jié)節(jié)性紅斑等自身免疫病癥的。

　　臨床取糞便、血液等標(biāo)本進(jìn)行微生物學(xué)檢查。多采用腸道選擇性鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)，25℃培養(yǎng)48h，根據(jù)生化反應(yīng)及動力等，作出初步判斷，最后用血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。

　　本菌感染應(yīng)用廣譜抗生素進(jìn)行治療。