第四節(jié) 炔雌醇及其制劑的分析

　　一、鑒別

　　1.硫酸熒光反應 加硫酸呈橙紅色，顯黃綠色熒光。加水生成玫瑰紅色沉淀。

　　2.與硝酸銀反應 生成白色炔化銀沉淀

　　3.紅外光譜法

　　二、其他甾體檢查：HPLC，不加校正因子的主成分自身對照法。 顯示的雜質(zhì)峰數(shù)不得超過4個;各雜質(zhì)峰面積及其總和不得大于對照溶液主峰面積的1/2和3/4。

　　三、含量測定

　　1.原料藥 HPLC，內(nèi)標法

　　2.片劑 KOBER反應比色法

　　指雌激素與硫酸-乙醇反應呈紅色，并在530nm附近有最大吸收。由于輔料對測定有干擾，先用水提取。

　　炔雌醇片的含量測定方法如下：

　　1.對照品溶液制備：精密稱取炔雌醇對照品25mg，置100ml量瓶中，加無水乙醇振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻;精密量取2ml，用無水乙醇稀釋至50ml，搖勻，即得(10μg/ml)。

　　2.供試品溶液的制備：取本品10片或20片，置具塞試管中，加水10ml，振搖使崩散、置水浴上加熱至半透明，放冷，精密加氯仿10ml，密塞，振搖20min，靜置分層后，吸取上層水溶液，加無水硫酸鈉0.5g，振搖脫水后，經(jīng)干燥濾紙濾過，棄取初濾液，精密量取續(xù)濾液2ml，置水浴中蒸干后，低溫干燥，放冷，精密加無水乙醇使溶解成每1ml中約含10μg的溶液，即得。

　　3.測定法：精密量取對照品溶液及供試品溶液各1ml，分別置試管中，在冰浴中冷卻，各精密滴加硫酸-乙醇(4：1)4ml，搖勻顯色后，在530nm的波長處分別測定吸收度，計算，即得。