第十六章 甾體激素類藥物的分析

　　掌握醋酸地塞米松及其制劑、丙酸睪酮、黃體酮、炔雌醇及其制劑的鑒別、雜質(zhì)檢查和含量測定方法。

　　基本結(jié)構(gòu)與分類

　　天然和人工合成品的甾體激素，均具有環(huán)戊烷駢多氫菲母核。分為腎上腺皮質(zhì)激素、雄性激素及蛋白同化激素、孕激素、雌激素等。

　　1.腎上腺皮質(zhì)激素

　　結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：有21個C原子;A環(huán)，具有Δ4-3-酮; C17，有α-醇酮基，并多數(shù)為α-羥基;C10、C13，有角甲基;C11，有羥基或酮基;其它，有些皮質(zhì)激素具有Δ1，6α、9α鹵素，16α羥基，6α、12α、16α、16β甲基等。

　　2.雄性激素及蛋白同化激素

　　如甲睪酮、丙酸睪酮、十一酸睪酮等;蛋白同化激素有苯丙酸諾龍。

　　結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：雄性激素母核具有19個C原子;蛋白同化激素母核具有18個C原子(C10上無角甲基);A環(huán)，具有Δ4-3-酮;C17，無側(cè)鏈，多數(shù)是一個β-羥基，有些是它形成的酯，有些具有α-甲基。

　　3.孕激素

　　中國藥典有：黃體酮、醋酸甲羥孕酮、己酸羥孕酮、醋酸甲地孕酮原料及制劑;醋酸氯地孕酮原料等。

　　結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：有21個C原子;A環(huán)，具有Δ4-3-酮; C17，有甲酮基，其它，有些具有Δ6，6β-甲基、6α-甲基、6β-氯。

　　4.雌激素

　　收載有：雌二醇、炔雌醚原料，苯甲酸雌二醇、戊酸雌二醇、炔雌醇原料及制劑等。

　　結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：具有18個C原子; A環(huán)，為苯環(huán);C3有酚羥基，有些形成酯或醚;C10，無角甲基;C17，有β-羥基或酮基，有些羥基形成了酯，有些具有乙炔基。

　　第一節(jié) 醋酸地塞米松及其制劑的分析

　　一、鑒別

　　1.與堿性酒石酸銅試液反應(yīng) C17-α-醇酮基具有還原性，生成橙紅色氧化亞銅沉淀

　　2.與硫酸反應(yīng) 在堿性條件下水解生成醋酸，與硫酸存在下與乙醇發(fā)生酯化反應(yīng)，具乙酸乙酯香氣。

　　3.有機(jī)氟化物反應(yīng) 氧瓶燃燒法破壞后，在醋酸-醋酸鈉緩沖液中，與茜素氟藍(lán)和硝酸亞鈰形成藍(lán)紫色配合物。

　　4.紅外光譜法

　　二、特殊雜質(zhì)檢查

　　1.其他甾體 TLC高低濃度對比法，用堿性四氮唑藍(lán)試液作顯色劑。

　　2.硒 按藥典附錄硒檢查法，測定吸收度，限度0.005%。

　　三、含量測定

　　1.原料藥含量測定 HPLC，內(nèi)標(biāo)法以峰面積計算含量

　　2.片劑 紫外分光光度法，吸收系數(shù)法計算含量

　　3.注射液 四氮唑比色法

　　原理 皮質(zhì)激素C17-α-醇酮基具有還原性，在強(qiáng)堿性溶液中能將四氮唑鹽定量地還原為有色甲簪。三苯基氯化四氮唑(縮寫為TTC)，其還原產(chǎn)物為不溶于水的深紅色三苯甲簪，λmax在485nm。

　　測定方法 精密量取對照品溶液及供試品溶液各1ml，分別置干燥具塞試管中，各精密加無水乙醇9ml與氯化三苯四氮唑試液1ml，搖勻，再精密加氫氧化四甲基銨試液1ml，搖勻，在25℃暗處放置40~50min，照分光光度法，在485nm的波長處分別測定吸收度，計算，即得。

　　討論 本法廣泛用于皮質(zhì)激素的測定，但測定時受結(jié)構(gòu)、溶劑、顯色溫度和時間、水分、堿的濃度、空氣中氧等，對反應(yīng)速度、呈色強(qiáng)度和穩(wěn)定性都有影響。

　　(1)溶劑和水分的影響：5%以下不影響，超過大時，呈色速度減慢，采用無醛溶劑。

　　(2)堿的種類和加入順序的影響：氫氧化四甲基銨較好，常用。但有研究表明，皮質(zhì)激素和氫氧化四甲基銨長時間(24h)接觸后，皮質(zhì)激素有部分分解，因此，先加四氮唑鹽溶液再加堿液好。

　　(3)空氣中氧及光線的影響：反應(yīng)及其產(chǎn)物對光敏感，因此必須用避光容器并置于暗處顯色，同時達(dá)到最大顯色時間后，立即測定吸收度。

　　(4)溫度與時間影響：顯色速度隨溫度增高而加快。一般以室溫或30℃恒溫條件下顯色，易得重線性較好的結(jié)果。中國藥典多數(shù)在25℃暗處反應(yīng)40~45min。