4.利用紫外線誘變選育高產(chǎn)β-胡蘿卜素的三孢布拉霉負(fù)菌，未突變菌不能在含有一定濃度的β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長，菌體隨β-胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色。圖甲為選育及提取獲得β-胡蘿卜素流程，請回答下列問題：

圖甲

圖乙

(1)用紫外線照射三孢布拉霉負(fù)菌的目的是__________________。為選出高產(chǎn)突變菌種，還應(yīng)在培養(yǎng)基中添加__________________，在接入菌種前，應(yīng)對培養(yǎng)基進(jìn)行____________，以避免雜菌污染。

(2)某同學(xué)進(jìn)行正確的接種操作后，平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是______________(填“稀釋涂布平板法”或“平板劃線法”);由于__________________________________________________，

所以培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌能生長形成菌落。

(3)進(jìn)行③過程時(shí)，應(yīng)選取________色的菌落接種至液體培養(yǎng)基。過程⑥是________，用紙層析法鑒定提取的胡蘿卜素粗品。

(4)將萃取的胡蘿卜素樣品與β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)樣品層析后進(jìn)行比對，結(jié)果如圖，從圖中分析可知，色帶________為β-胡蘿卜素。

【解析】　(1)利用紫外線處理三孢布拉霉負(fù)菌的目的是使其發(fā)生基因突變。由于未突變菌不能在含有一定濃度的β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長，所以為選出高產(chǎn)突變菌種，還應(yīng)在培養(yǎng)基中添加一定濃度的β-紫羅酮。在接入菌種前，應(yīng)對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，以避免雜菌污染。

(2)使用稀釋涂布平板法經(jīng)過程②接種培養(yǎng)后的菌落分布符合題圖;由于基因突變頻率低和不定向，只有少數(shù)基因突變的菌才能生長、繁殖，所以只有少數(shù)菌能生長形成菌落。

(3)菌體隨β-胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色，所以進(jìn)行③過程時(shí)，應(yīng)選取橙紅色的菌落接種至液體培養(yǎng)基。分析題圖可知，過程⑥為濃縮。

(4)分析圖示可知，通過與標(biāo)準(zhǔn)樣品層析結(jié)果對比可判斷色帶Ⅰ為β-胡蘿卜素。

【答案】　(1)誘導(dǎo)其發(fā)生基因突變　一定濃度的β-紫羅酮　高壓蒸汽滅菌　(2)稀釋涂布平板法　基因突變頻率低，只有少數(shù)基因突變的菌才能生長、繁殖　(3)橙紅　濃縮　(4)Ⅰ

5.(2016·廣西南寧一模)薄荷葉富含維生素、蛋白質(zhì)和薄荷油，具有疏散風(fēng)熱、清利咽喉、消炎鎮(zhèn)痛的作用。請回答下列問題：

(1)植物芳香油的提取方法有蒸餾法、壓榨法和________等。提取薄荷油可以用水蒸氣蒸餾法，該方法能利用水蒸氣將____________的薄荷油攜帶出來。

(2)在提取薄荷油的過程中，向得到的油水混合物加入NaCl后，薄荷油將分布于液體的________(填“上層”或“下層”)，然后用________將這兩層分開。分離得到的薄荷油油層中含有一定量的水分，可用____________吸水。

(3)可用植物組織培養(yǎng)的方法對薄荷進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，在接種前工作臺(tái)需用__________________擦拭一遍。之后所有的接種操作都必須在____________旁進(jìn)行。培養(yǎng)基中的生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值________(填“低”“高”或“相當(dāng)”)時(shí)，有利于芽的分化。

【解析】　(1)植物芳香油的提取方法有蒸餾法、壓榨法和萃取法等。薄荷油具有揮發(fā)性強(qiáng)的特點(diǎn)，可用水蒸氣蒸餾法提取。

(2)在提取薄荷油的過程中，向得到的油水混合物加入NaCl后薄荷油將分布在上層。可用分液漏斗將兩層分開。用無水Na2SO4將薄荷油中的水除去。

(3)接種前工作臺(tái)需用體積分?jǐn)?shù)70%的酒精擦拭一遍，接種操作需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行。培養(yǎng)基中生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值低，有利于芽的分化。

【答案】　(1)萃取法　揮發(fā)性較強(qiáng)

(2)上層　分液漏斗　無水Na2SO4

(3)體積分?jǐn)?shù)70%的酒精　酒精燈火焰　低

6.(2016·佛山市二模)牛奶中富含蛋白質(zhì)，長期飲用有助于增強(qiáng)體質(zhì)，但牛奶同時(shí)也是多種疾病的傳播載體。國家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細(xì)菌數(shù)小于30 000個(gè)。以下是牛奶消毒及細(xì)菌檢測實(shí)驗(yàn)。

(1)圖中步驟①稱為________消毒法。步驟②是________。

(2)培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供________。進(jìn)行步驟③操作時(shí)，應(yīng)選用下列中的哪種工具?________。為了避免雜菌污染，此步驟應(yīng)在______________附近進(jìn)行。

(3)將接種后的培養(yǎng)基和作為對照的__________________同時(shí)放入37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)36小時(shí)。取出后統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù)，結(jié)果如下表所示。應(yīng)該選擇其中稀釋倍數(shù)為________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，經(jīng)過消毒后的牛奶中，細(xì)菌數(shù)大約是________/mL。

牛奶稀釋倍數(shù) 10-2 10-5 10-4 平板1菌落數(shù) 87 10 1 平板2菌落數(shù) 83 12 1 平板3菌落數(shù) 85 10 0 【解析】　(1)80 ℃恒溫水浴15 min是巴氏消毒法，步驟②是進(jìn)行系列稀釋(或梯度稀釋)。

(2)培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供碳源、氮源(和維生素)，③是接種，因?yàn)樾枰��?jì)數(shù)，需用稀釋涂布平板法，接種工具是涂布器;為了避免雜菌污染，此步驟應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。

(3)統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù)時(shí)，應(yīng)選擇菌落數(shù)在30～300的計(jì)數(shù)，經(jīng)過消毒后的牛奶中，細(xì)菌數(shù)大約是(87+83+85)÷3÷10-2=8 500個(gè)。

【答案】　(1)巴氏　系列稀釋(或梯度稀釋)　(2)碳源、氮源(和維生素)　B　酒精燈火焰　(3)一個(gè)未接種的培養(yǎng)基　10-2　8 500個(gè)