四、填空題(每空0.5分)

　　1.生物氧化酶類有________、________、________、________等。【需氧脫氫酶、不需氧脫氫酶、氧化酶、過(guò)氧化氫酶、過(guò)氧化物酶、SOD、加單(雙)氧酶，任選4】

　　2.細(xì)胞內(nèi)ATP的生成方式有__________、__________。主要方式是__________。【底物水平磷酸化、氧化磷酸化;氧化磷酸化】

　　3.NADH呼吸鏈的排列順序?yàn)開(kāi)_______、_________、________、________、________、_________、_________�！綨ADH、FMN、CoQ、Cytb、CytC1、CytC、Cytaa3】

　　4.呼吸鏈中氧化磷酸化的偶聯(lián)發(fā)生在__________、___________、__________三個(gè)部位�！綨ADH和CoQ之間、CoQ和Cytc、Cytaa3和O2之間】

　　五、名詞解釋題(每小題2分)

　　1.生物氧化：【物質(zhì)在生物體內(nèi)氧化成二氧化碳和水并放出能量的過(guò)程�！�

　　2.呼吸鏈：【遞氫體或遞電子體按一定順序排列在線粒體內(nèi)膜上經(jīng)一系列連鎖進(jìn)行的氧化還原反應(yīng)將代謝物脫下的氫和電子傳遞給氧結(jié)合成水的過(guò)程。】

　　3.底物水平磷酸化：【由于脫氫或脫水等作用，使代謝物分子內(nèi)部能量重新分布而形成高能磷酸化合物(或高能硫酯化合物)，然后將高能鍵轉(zhuǎn)移給ADP(或GDP)生成ATP(或GTP)的反應(yīng)稱為底物水平磷酸化�！�

　　4.氧化磷酸化：【氧化磷酸化又稱為電子傳遞水平磷酸化。在生物氧化過(guò)程中，代謝物脫下的氫經(jīng)呼吸鏈氧化生成水的同時(shí)，所釋放出的能量用于ADP磷酸化生成ATP，這種氧化與磷酸化相偶聯(lián)的過(guò)程稱為氧化磷酸化�！�

　　5.P/O比值：【P/O比值是物質(zhì)氧化時(shí)，每消耗1摩爾氧原子所消耗的無(wú)機(jī)磷的摩爾數(shù)(或ADP摩爾數(shù))，即生成ATP的摩爾數(shù)�！�

　　6.解偶聯(lián)劑：【不影響呼吸鏈的電子傳遞，只抑制由ADP生成ATP的磷酸化過(guò)程。使氧化磷酸化脫節(jié)，P/O比值降低甚至為0。代表性化合物是二硝基苯酚】

　　7.高能化合物【生物化學(xué)中把磷酸化合物水解時(shí)釋出的能量>30kJ/mol者稱為高能磷酸化合物，其所含的鍵稱為高能磷酸鍵�！�

　　8.SOD：【超氧物歧化酶，可催化超氧陰離子還原為H2O2+O2】

　　9.呼吸鏈復(fù)合體：【呼吸鏈中的各種遞氫體和遞電子體多數(shù)是緊密的鑲嵌在線粒體內(nèi)膜中，成為內(nèi)膜結(jié)構(gòu)重要的組成成分。用去垢劑溫和處理線粒體內(nèi)膜，可分離得到四種仍具傳遞電子功能的復(fù)合體�！�

　　六、問(wèn)答題

　　1.比較生物氧化與體外燃燒的異同點(diǎn)。(4分)

　　【相同點(diǎn)：終產(chǎn)物都是二氧化碳和水;釋放的總能量也完全相同。

　　不同點(diǎn)：體外燃燒是有機(jī)物的碳和氫與空氣中的氧直接化合成 CO2 和 H2O ，并驟然以光和熱的形式向環(huán)境散發(fā)出大量能量。而生物氧化反應(yīng)是在體溫及近中性的 PH 環(huán)境中通過(guò)酶的催化下使有機(jī)物分子逐步發(fā)生一系列化學(xué)反應(yīng)。反應(yīng)中逐步釋放的能量有相當(dāng)一部分可以使 ADP 磷酸化生成 ATP ，從而儲(chǔ)存在 ATP 分子中，以供機(jī)體生理生化活動(dòng)之需。一部分以熱的形勢(shì)散發(fā)用來(lái)維持體溫�！�

　　2.呼吸鏈的組成成分有哪些?試述主要的呼吸鏈及排列順序。(6分)

　　【組成成分：NAD+，黃素蛋白(輔基FMN、 FAD)，鐵硫蛋白，輔酶Q，細(xì)胞色素b、c1、c、a、a3

　　主要的呼吸鏈有NADH氧化呼吸鏈和FADH2氧化呼吸鏈。

　　呼吸鏈排列順序： 　　FAD

　　(Fe-S)

　　↓

　　NADH→(FMN)→CoQ→Cytb→Cytc1→Cytc→Cytaa3→O2】

　　(Fe-S)

　　3.需氧脫氫酶和不需氧脫氫酶有何不同?(4分)

　　【需氧脫氫酶：直接以氧為受氫體，反應(yīng)產(chǎn)物有H2O2

　　不需氧脫氫酶：不能以氧為受氫體，將底物的氫轉(zhuǎn)移到另一物質(zhì)，不產(chǎn)生H2O2】

　　4.當(dāng)肝線粒體氧化磷酸化所需各種底物充分時(shí)分別加入：①魚(yú)藤酮，②抗霉素A。描述線粒體內(nèi)NAD+、NADH脫氫酶、CoQ、Cytb、Cytc、Cyta的氧化還原狀態(tài)。(4分)

　　【加入魚(yú)藤酮后：NAD+、NADH脫氫酶還原狀態(tài)，CoQ、Cytb、Cytc、Cyta氧化狀態(tài)。

　　加入抗霉素A后：NAD+、NADH脫氫酶、CoQ、Cytb還原狀態(tài)，Cytc、Cyta氧化狀態(tài)�！�

　　5.試述氧化磷酸化的偶聯(lián)部位;用哪些方法可以證明氧化磷酸化的偶聯(lián)部位?(6分)

　　【三個(gè)偶聯(lián)部位：NADH和CoQ之間;CoQ和Cytc之間;Cytaa3和O2之間

　　證明方法：①計(jì)算P/O比值：β-羥丁酸的氧化是通過(guò)NADH呼吸鏈，測(cè)得P/O比值接近于3。琥珀酸氧化時(shí)經(jīng)FAD到CoQ，測(cè)得P/O比值接近于2，因此表明在NAD+與CoQ之間存在偶聯(lián)部位，抗壞血酸經(jīng)Cytc進(jìn)入呼吸鏈，P/O比值接近于1，而還原型Cytc經(jīng)aa3被氧化，P/O比值接近1，表明在aa3到氧之間也存在偶聯(lián)部位。從β-羥丁酸，琥珀酸和還原型Cytc氧化時(shí)P/O比值的比較表明，在CoQ與C之間存在另一偶聯(lián)部位。因此NADH呼吸鏈存在三個(gè)偶聯(lián)部位，琥珀酸呼吸鏈存在兩個(gè)偶聯(lián)部位。②計(jì)算各階段所釋放的自由能變化來(lái)推測(cè)偶聯(lián)部位。已知每產(chǎn)生一克分子ATP，需要能量30.5kJ(或7.3K cal)上述部位的自由能變化均大于此值。電子傳遞鏈的其它部位自由能變化均小于此值，無(wú)偶聯(lián)，釋出的能量以熱能形式散發(fā)�！�

　　6.試述影響氧化磷酸化的因素。(6分)

　　【抑制劑：

　　(1)呼吸鏈抑制劑：阻斷呼吸鏈不同環(huán)節(jié)的電子傳遞，常見(jiàn)的有阿米妥魚(yú)藤酮抗霉素A H2S、CO、CN-、疊氮化合物(N3-)等

　　(2)解偶聯(lián)劑：不影響呼吸鏈的電子傳遞，只抑制由ADP生成ATP的磷酸化過(guò)程。使氧化磷酸化脫節(jié)，P/O比值降低甚至為0。解偶聯(lián)劑中最常見(jiàn)的是二硝基苯酚。

　　(3)氧化磷酸化抑制劑：對(duì)電子傳遞和ADP磷酸化都有抑制。如寡霉素。

　　ADP和ATP的調(diào)節(jié)：當(dāng)細(xì)胞內(nèi)某些需能過(guò)程速度加快，ATP分解為ADP和Pi，ADP濃度增高，轉(zhuǎn)運(yùn)入線粒體后使氧化磷酸化速度加快;反之ADP不足，使氧化磷酸化速度減慢，這種調(diào)節(jié)作用可使ATP的生成速度適應(yīng)生理需要。

　　甲狀腺素：甲狀腺素可活化許多組織細(xì)胞膜上的N+-K+-ATP酶，使ATP加速分解為

　　ADP和Pi，ADP增加促進(jìn)氧化磷酸化。由于ATP的合成和分解速度均增加，另外甲

　　狀腺素(T3)還可使解偶聯(lián)蛋白基因表達(dá)增加，因而引起耗氧和產(chǎn)熱均增加。所以

　　甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)的病人基礎(chǔ)代謝率增高。】