答案部分
一、A1
1、
【正確答案】 C
【答案解析】 重組DNA的連接包括下述內(nèi)容,其中不包括C。外源DNA片段和線狀質(zhì)粒載體的連接,也就是在雙鏈DNA5'磷酸和相鄰的3'羥基之間形成的新的共價(jià)鏈。粘端連接、平端DNA連接、質(zhì)粒載體中的快速克隆都是重組DNA的連接方式。
2、
【正確答案】 B
【答案解析】 基因重組只包括:接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)座。而基因轉(zhuǎn)換特指減數(shù)分裂過(guò)程中兩條染色體非同源DNA片段的轉(zhuǎn)移,不屬于基因重組。
3、
【正確答案】 E
【答案解析】 限制性?xún)?nèi)切酶可分為兩大類(lèi),即I類(lèi)酶和II酶。相當(dāng)一部分酶(如EcoRI、BamHI、Hind等)的切口,作用點(diǎn)有180°旋轉(zhuǎn)對(duì)稱(chēng)性,因而可形成粘性末端,但也有一些II類(lèi)酶如BsuRI、BalI、HalIII、HPaI、SmaI等切割DNA分子并不產(chǎn)生粘性末端,而只形成平整末端。
4、
【正確答案】 B
【答案解析】 質(zhì)粒是染色體外能夠進(jìn)行自主復(fù)制的遺傳單位,包括真核生物的細(xì)胞器和細(xì)菌細(xì)胞中染色體以外的脫氧核糖核酸(DNA)分子。已發(fā)現(xiàn)有質(zhì)粒的細(xì)菌有幾百種,已知的絕大多數(shù)的細(xì)菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子(簡(jiǎn)稱(chēng)cccDNA)。
5、
【正確答案】 B
【答案解析】 外源DNA片段和線狀質(zhì)粒載體的連接,也就是在雙鏈DNA5'磷酸和相鄰的3'羥基之間形成的新的共價(jià)鏈。如質(zhì)粒載體的兩條鏈都帶5'磷酸,可生成4個(gè)新的磷酸二酯鏈。但如果質(zhì)粒DNA已去磷酸化,則吸能形成2個(gè)新的磷酸二酯鏈。在這種情況下產(chǎn)生的兩個(gè)雜交體分子帶有2個(gè)單鏈切口,當(dāng)雜本導(dǎo)入感受態(tài)細(xì)胞后可被修復(fù)。相鄰的5'磷酸和3'羥基間磷酸二酯鍵的形成可在體外由兩種不同的DNA連接酶催化,這兩種酶就是大腸桿菌DNA連接酶和T4噬菌體DNA連接酶。實(shí)際上在有克隆用途中,T4噬菌體DNA連接酶都是首選的用酶。這是因?yàn)樵谙率龇磻?yīng)條件下,它就能有效地將平端DNA片段連接起來(lái)。
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