藥品質(zhì)量檢驗與體內(nèi)藥物檢測

　　一、藥品檢驗程序與項目

　　取樣→檢驗→記錄報告

　　其中檢驗包含：性狀、鑒別、檢查、含量或效價測定。

　　1.對取樣的要求：

　　(1)同批、真實(shí)、代表性的部分產(chǎn)品，取樣方法科學(xué);

　　(2)n≤100時：依據(jù)《樣品抽樣指導(dǎo)原則》取樣;

　　(3)n>100時：取樣件數(shù)應(yīng)為根號N;

　　(4)全批、多部位、等量取樣;

　　(5)一次取樣一般為3倍全檢量，貴重藥品2倍全檢量。

　　2.性狀

　　熔點(diǎn)測定法

　　測定方法：毛細(xì)管測定法

　　第1法用于測定易粉碎的固體藥品;

　　第二法用于測定不易粉碎的固體藥品，如脂肪、脂肪酸、石蠟、羊毛脂等;

　　第三法用于測定凡士林或其他類似物質(zhì)。

　　當(dāng)各品種項下未注明時，均系指第1法。

　　旋光度測定法

　　比旋度：偏振光透過長1dm，且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液，在一定波長與溫度下，測得的旋光度。

　　比旋度以[α]tD表示(規(guī)定溫度20℃、波長鈉光譜589.3nm、濃度1g/ml和旋光管長度1dm的旋光度)。

　　比旋度是旋光物質(zhì)的重要物理常數(shù)，可以用來區(qū)別藥物或檢查藥物的純雜程度，也可用來測定含量。

　　3.鑒別

　　常用鑒別方法有化學(xué)鑒別法、光譜鑒別法和色譜鑒別法。

　　(1)化學(xué)鑒別法

　　常見的呈色反應(yīng)：

　　阿司匹林水解后與三氯化鐵的反應(yīng)(紫堇色);

　　去氧腎上腺素與三氯化鐵試液反應(yīng)顯紫色;

　　腎上腺素與三氯化鐵試液反應(yīng)則顯翠綠色。

　　重氮化-偶合反應(yīng)(芳香第1胺反應(yīng))：磺胺甲噁唑與亞硝酸鈉、β-萘酚的反應(yīng)。

　　雙縮脲反應(yīng)：鹽酸麻黃堿與硫酸銅的反應(yīng)。

　　Vitali反應(yīng)(托烷類生物堿反應(yīng))：硫酸阿托品與醇制氫氧化鉀的反應(yīng)。

　　Marquis反應(yīng)：嗎啡與甲醛一硫酸的反應(yīng);

　　硫色素反應(yīng)：維生素B1與鐵氰化鉀的反應(yīng);

　　褪色反應(yīng)：司可巴比妥鈉可使碘試液褪色，維生素C可使二氯靛酚鈉試液褪色。

　　常見的沉淀反應(yīng)：

　　苯巴比妥與重金屬銀鹽的反應(yīng)：一銀鹽，二銀鹽;

　　葡萄糖與堿性酒石酸銅的反應(yīng)。

　　常見的氣體生成反應(yīng)：

　　尼可剎米與氫氧化鈉的反應(yīng)：二乙胺。

　　常見的焰色反應(yīng)：

　　鈉鹽—鮮黃色;鉀鹽—紫色;鈣鹽—磚紅色。

　　【最佳選擇題】

　　阿司匹林可用三氯化鐵鑒別的原理是

　　A.三氯化鐵被還原而顯色

　　B.阿司匹林被氧化而顯色

　　C.阿司匹林與三價鐵配位而顯色

　　D.阿司匹林水解產(chǎn)物水楊酸與三價鐵配位而顯色

　　E.阿司匹林水解產(chǎn)物水楊酸被氧化而顯色

　　『正確答案』D

　　『答案解析』阿司匹林水解后與三氯化鐵的反應(yīng)(紫堇色)

　　【配伍選擇題】

　　A.芳香第1胺類的反應(yīng)

　　B.丙二酰脲類的反應(yīng)

　　C.綠奎寧反應(yīng)

　　D.托烷生物堿類的反應(yīng)

　　E.與二氯靛酚鈉試液的反應(yīng)

　　1.鑒別苯巴比妥依據(jù)的反應(yīng)是

　　2.鑒別維生素C依據(jù)的反應(yīng)是

　　3.鑒別硫酸奎寧依據(jù)的反應(yīng)是

　　4.鑒別磺胺甲噁唑依據(jù)的反應(yīng)是

　　『正確答案』BECA

　　『答案解析』丙二酰脲的銀鹽反應(yīng)：巴比妥類+碳酸鈉+硝酸銀→白色沉淀，巴比妥屬于環(huán)丙二酰脲類化合物;

　　維生素C(具還原性)使二氯靛酚鈉試液褪色;

　　綠奎寧反應(yīng)系含氧喹啉(喹啉環(huán)上含氧)衍生物的特征反應(yīng)硫酸奎寧和硫酸奎尼丁都顯綠奎寧反應(yīng)，在藥物微酸性水溶液中，滴加微過量的溴水或氯水，再加入過量的氨水溶液，即顯翠綠色。

　　具有芳伯氨基的芳香第1胺類藥物，如磺胺甲噁唑的鑒別是在酸性條件下芳伯氨基與亞硝酸鈉反應(yīng)生成重氮鹽，再與堿性β-萘酚縮合可生成橙黃色至猩紅色的偶氮化合物

　　(2)光譜鑒別法：紫外光譜法和紅外光譜法。

　　光譜范圍：

　　200nm～400nm為紫外區(qū);

　　400nm～760nm為可見區(qū);

　　760nm～2500nm為近紅外區(qū);

　　2.5μm～25μm(波數(shù)4000～400cm-1)為中紅外光區(qū)。

　　紫外光譜鑒別法(UV)：比較最大或最小吸收波長。

　　紅外分光光度法(IR)：縱坐標(biāo)為透光率(T%);橫坐標(biāo)為紅外光波數(shù)(cm-1)。

　　官能團(tuán)區(qū)：4000～1300cm-1

　　指紋區(qū)：1300～400cm-1

　　常見官能團(tuán)的紅外吸收

　　(3)色譜鑒別法：一種分離分析方法。

　　保留時間tR從進(jìn)樣開始到某個組分色譜峰頂點(diǎn)的時間間隔。

　　半高峰寬Wh/2=2.355σ　峰高一半處的峰寬。

　　峰寬W=4σ=1.699Wh/2　色譜峰兩側(cè)的拐點(diǎn)作切線，在基線上的截距。

　　峰高h(yuǎn)　組分色譜峰頂點(diǎn)至?xí)r間軸的垂直距離。

　　峰面積A　組分色譜峰與基線圍成的區(qū)域的面積。

　　描述色譜峰的三大參數(shù)：

　�、俜逦�(用保留時間表示，用于定性);

　�、诜甯呋蚍迕娣e(用于定量);

　　③峰寬(用于衡量柱效)。

　　用于鑒別的色譜法有薄層色譜法(TLC)和有效液相色譜法(HPLC)

　　TLC法一般采用對照品(標(biāo)準(zhǔn)品)比較法，要求供試品斑點(diǎn)的比移值(Rf)與對照品的一致。

　　HPLC法一般采用對照品(標(biāo)準(zhǔn)品)比較法，要求供試品溶液中藥物色譜峰的保留時間(tR)與對照品的一致。

　　4.檢查(純度檢查)

　　化學(xué)法、光譜法、色譜法。

　　(1)化學(xué)分析法—雜質(zhì)的限量檢查

　　雜質(zhì)限量：藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。

　　一般雜質(zhì)檢查常用

　　方法對比：藥物　化學(xué)反應(yīng)　顏色(渾濁)

　　雜質(zhì)對照品(定量)　化學(xué)反應(yīng)　顏色(渾濁)

　　常見檢查：

　　阿司匹林溶液澄清度檢查，檢測不溶于碳酸鈉的酯類;

　　重金屬檢查(以鉛為代表)，pH3.5的醋酸鹽緩沖液，反應(yīng)試劑為硫代乙酰胺。

　　熾灼殘渣：

　　檢查藥物中的無機(jī)雜質(zhì)，溫度700℃～800℃;

　　若繼續(xù)重金屬檢查，則用500℃～600℃。

　　(2)光譜分析法

　　特殊雜質(zhì)：在特定波長處具有顯著吸收的特定有關(guān)物質(zhì)。

　　常見檢查

　　腎上腺素中的酮體——紫外-可見分光光度法

　　地蒽酚中的二羥基蒽醌——紫外-可見分光光度法

　　硫酸阿托品中的莨菪堿——旋光度法

　　(3)色譜分析法

　　特定雜質(zhì)、有關(guān)物質(zhì)與殘留溶劑的檢查。

　　薄層色譜法：雜質(zhì)對照(有雜質(zhì)對照品)、自身稀釋對照(無雜質(zhì)對照品)。

　　有效液相色譜法：內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法(有雜質(zhì)對照品)、加校正因子的主成分自身對照法、不加校正因子的主成分自身對照法、面積歸一化法。

　　氣相色譜法(GC)：主要檢查殘留溶劑。