白細(xì)胞計數(shù)

　　【準(zhǔn)備】

　　1.個人準(zhǔn)備 穿好工作服，戴好口罩、帽子。

　　2.物品準(zhǔn)備 查看實(shí)驗(yàn)所需器材、試劑是否齊全，如不全，應(yīng)及時向工作人員提出。查看Neubauer計數(shù)板的計數(shù)池是否潔凈，如有污染應(yīng)進(jìn)行清潔。

　　3.本實(shí)驗(yàn)所需器材、試劑：刻度吸管，吸耳球、微量吸管，棉球，試管，Neubauer計數(shù)板，蓋玻片，計時器，顯微鏡，白細(xì)胞稀釋液。

　　【操作】

　　1.加稀釋液：用吸管吸取白細(xì)胞稀釋液0.38毫升于小試管中。

　　2.加血：用微量吸管吸取新鮮全血20μl，擦去管尖外部余血。

　　3.將吸管插入小試管中白細(xì)胞稀釋液底部，輕輕放出全血液，并吸取上層白細(xì)胞稀釋液清洗吸管2～3次。

　　4.混勻：將試管中的血液與稀釋液混勻，待細(xì)胞懸液完全變?yōu)樽睾稚��?/P>

　　5.充池：再次將小試管中的細(xì)胞懸液混勻。

　　6.用微量吸管吸取細(xì)胞懸液，注入Neubauer計數(shù)板的計數(shù)池中，室溫下靜置2～3min，待白細(xì)胞完全下沉后在做白細(xì)胞計數(shù)。

　　7.計數(shù)：在低倍鏡下計數(shù)四角4個大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)，計算：白細(xì)胞/L=N/20 ×109 (N表示4個大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù))，報告計數(shù)結(jié)果。

　　【操作后】

　　1.關(guān)閉顯微鏡電源。

　　2.將使用過的一次性器材，剩余標(biāo)本置于污物桶中。

　　【注意事項(xiàng)】

　　1.加稀釋液、血液體積應(yīng)準(zhǔn)確。

　　2.用微量吸管吸取新全血20μl后，應(yīng)擦去管尖外部余血。

　　3.用白細(xì)胞稀釋液清洗微量吸管是不應(yīng)有氣泡產(chǎn)生

　　4.充池應(yīng)一次完成，不可充液過多、過少或有氣泡產(chǎn)生。充池后不能移動蓋玻片。

　　5.計數(shù)時，各大方格間細(xì)胞數(shù)相差不超過10%，如相差過大，說明充池不均勻，應(yīng)重新充池。