一、選擇題
1.現(xiàn)有甲、乙兩種植物(均為二倍體純種)，其中甲種植物的光合作用能力高于乙種植物，但乙種植物很適宜在鹽堿地種植。且相關(guān)性狀均為核基因控制。要利用甲、乙兩種植物的優(yōu)勢(shì)，培育出高產(chǎn)、耐鹽的植株，有多種生物技術(shù)手段可以利用。下列所采用的技術(shù)手段中，不可行的是( )
A.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，可獲得滿足要求的四倍體雜種目的植株
B.將乙種植物耐鹽基因?qū)氲郊追N植物的受精卵中，可培育出目的植株
C.兩種植物雜交后，得到的F1再利用單倍體育種技術(shù)，可較快獲得純種的目的植株
D.誘導(dǎo)兩種植物的花粉融合，并培育成幼苗，幼苗用秋水仙素處理，可培育出目的植株
[答案] C
[解析] 兩種植物存在著生殖隔離，無(wú)法雜交，即使能夠雜交，所得F1也不能產(chǎn)生正�？捎呐渥�，因而不能用于單倍體育種。
2.下列是應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟，其中對(duì)單克隆抗體制備的相關(guān)敘述中不正確的是( )
�、�?gòu)幕脊撬枇龅男∈篌w內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞
②將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞
�、蹖㈦s交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)
�、芎Y選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞
⑤利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞
�、迯母顾刑崛】贵w
�、呃么偌�(xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合
A.實(shí)驗(yàn)順序應(yīng)當(dāng)是①②⑦⑤④③⑥
B.③過(guò)程中產(chǎn)生的多個(gè)雜交瘤細(xì)胞稱為克隆
C.⑦過(guò)程獲得的細(xì)胞均可無(wú)限增殖
D.利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體過(guò)程中通常要經(jīng)過(guò)兩次篩選
[答案] C
[解析] 骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合時(shí)能出現(xiàn)三種融合的細(xì)胞，分別是兩個(gè)B淋巴細(xì)胞的融合細(xì)胞、兩個(gè)骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞。其中，兩個(gè)淋巴細(xì)胞融合產(chǎn)生的雜交細(xì)胞不能無(wú)限增殖。克隆分為分子水平、細(xì)胞水平和個(gè)體水平三個(gè)層次，雜交瘤細(xì)胞的無(wú)限增殖屬于細(xì)胞水平的克隆。
3.隨著生物技術(shù)的迅速發(fā)展，已滅絕生物的“復(fù)活”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛剛死亡，下列“復(fù)活”野驢的方法中，最可行的是( )
A.將野驢的體細(xì)胞取出，利用組織培養(yǎng)技術(shù)，經(jīng)脫分化、再分化，培育成新個(gè)體
B.取出野驢的體細(xì)胞兩兩融合，再經(jīng)組織培養(yǎng)培育成新個(gè)體
C.取出野驢的體細(xì)胞核移植到家驢的去核卵母細(xì)胞中，經(jīng)孕育培養(yǎng)成新個(gè)體
D.將野驢的基因?qū)爰殷H的受精卵中，培育成新個(gè)體
[答案] C
[解析] 選項(xiàng)C為用克隆的方法“復(fù)制”剛剛死亡的野驢。
二、非選擇題
4.科學(xué)家用植物體細(xì)胞雜交方法，將番茄的原生質(zhì)體和馬鈴薯的原生質(zhì)體融合，成功地培育出了“番茄-馬鈴薯”雜種植株(如圖所示)，其中①～⑤表示過(guò)程，英文字母表示細(xì)胞、組織或植株。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：
(1)在實(shí)現(xiàn)過(guò)程②的技術(shù)之前使用________酶處理細(xì)胞以去除細(xì)胞壁。
(2)在將雜種細(xì)胞培育成為雜種植株的過(guò)程中，依據(jù)的原理是________，其中過(guò)程④相當(dāng)于________過(guò)程，過(guò)程⑤涉及的分裂方式為________。
(3)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體，馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)有n條染色體，則“番茄—馬鈴薯”細(xì)胞內(nèi)含________條染色體;若雜種細(xì)胞培育成的“番茄—馬鈴薯”植株為四倍體，則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培育得到的植株屬于________倍體植株。
(4)若將該方案用在單克隆抗體制備過(guò)程中，請(qǐng)用箭頭把下列各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的順序連接起來(lái)：
[答案] (1)纖維素酶和果膠 (2)細(xì)胞的全能性 脫分化 有絲分裂 (3)m+n 單
(4)
[解析] (1)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中應(yīng)該用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。(2)雜種細(xì)胞培育成為雜種植株依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性，雜種細(xì)胞的組織培養(yǎng)過(guò)程要經(jīng)過(guò)脫分化和再分化過(guò)程，在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中只涉及有絲分裂。(3)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體，馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)有n條染色體，則產(chǎn)生的“番茄—馬鈴薯”細(xì)胞所含的染色體為m+n條，屬于異源四倍體。該雜種植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)得到的植株無(wú)論含幾個(gè)染色體組，均為單倍體。(4)制備單克隆抗體的過(guò)程包括“正常小鼠免疫處理→融合→篩選→提純”四步。
5.如圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病(基因缺陷導(dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素)的過(guò)程圖解，請(qǐng)據(jù)圖回答：
(1)圖中所涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有________________等。(寫3個(gè))
(2)圖中①結(jié)構(gòu)表示______________;選擇____________(時(shí)期)的卵母細(xì)胞去核后作為受體細(xì)胞構(gòu)建重組細(xì)胞A。②所示的細(xì)胞是__________________。
(3)將健康胰島B細(xì)胞基因?qū)擘谥耙獦?gòu)建______________，這是基因工程的核心，除含目的基因外，還必須含有______________等。
(4)重組細(xì)胞B在一定的細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑作用下，可以定向分化形成具有正常胰島B細(xì)胞功能的胰島樣細(xì)胞，其根本原因是________________________________________。培養(yǎng)重組細(xì)胞B的培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)成分包括__________________(至少寫兩種)。
(5)圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是______________________。
[答案] (1)細(xì)胞核移植、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)
(2)細(xì)胞核 MⅡ中期(或減數(shù)第二次分裂中期) 內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞(或胚胎干細(xì)胞)
(3)基因表達(dá)載體 啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因
(4)基因的選擇性表達(dá) 糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、血清或血漿
(5)沒有免疫排斥反應(yīng)
6.逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是一種表達(dá)型質(zhì)粒，結(jié)構(gòu)如圖所示。圖上的“逆轉(zhuǎn)錄病毒序列”可以整合到動(dòng)物細(xì)胞的染色體上，不斷地表達(dá)其攜帶的目的基因，獲得大量重組逆轉(zhuǎn)錄病毒。(E、F、H分別為限制酶E、F、H的酶切位點(diǎn))。
(1)逆轉(zhuǎn)錄的模板是________，原料是________________。
(2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，目的基因插入該質(zhì)粒，此過(guò)程需要的酶是限制酶________和________。
(3)將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌前用某種離子處理大腸桿菌使之成為________，才能完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加________的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
(4)獲取大量重組質(zhì)粒后，可培育轉(zhuǎn)基因小鼠，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入小鼠受精卵的方法是______________。若目的基因進(jìn)入細(xì)胞后插入到一條染色體DNA上，那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子小鼠的方法是________________。
[答案] (1)RNA (四種)脫氧核苷酸 (2)F DNA連接酶 (3)感受態(tài)細(xì)胞 抗生素A (4)顯微注射(法) 轉(zhuǎn)基因小鼠間相互交配(或雜交)
[解析] (1)逆轉(zhuǎn)錄是以RNA為模板，合成DNA的過(guò)程，原料是4種脫氧核苷酸。(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，需要用同種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，使之產(chǎn)生相同的黏性末端，因逆轉(zhuǎn)錄病毒序列在F處，所以用限制酶F進(jìn)行切割，再用DNA連接酶連接，形成重組質(zhì)粒。(3)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到大腸桿菌，一般用Ca2+處理大腸桿菌使之成為感受態(tài)細(xì)胞，才能完成轉(zhuǎn)化過(guò)程，質(zhì)粒上含有抗生素A抗性基因，如果重組質(zhì)粒導(dǎo)入到受體細(xì)胞成功，則受體細(xì)胞在含抗生素A的培養(yǎng)基上培養(yǎng)能正常生存。所以為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加抗生素A的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。(4)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到小鼠受精卵中的方法是顯微注射法;將目的基因插入到小鼠的一條染色體DNA上，則小鼠為雜合子，要想獲得轉(zhuǎn)基因純合子小鼠可以讓雜合子小鼠之間，相互交配(或雜交)。
7.通過(guò)細(xì)胞工程技術(shù)，利用甲、乙兩種高等植物的各自優(yōu)勢(shì)，培育具有抗病、耐鹽優(yōu)良性狀的雜種植株。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
(1)A處理目前最常用的方法是________;PEG誘導(dǎo)形成B的原理是________;幼苗C都具有________的優(yōu)良性狀。從C得到目的植株的選擇，根本上改變了該植物群體的________________。
(2)植物生理學(xué)上將植物體的葉綠體光合作用合成的有機(jī)物的量稱為植物體的總同化量;而植物體的凈同化量為總同化量與細(xì)胞呼吸消耗的有機(jī)物量的差值。將狀況相同的目的植株若干均分成6組，在不同溫度下分別暗處理1h，再光照1h(除外界溫度不同外，光照強(qiáng)度等其他實(shí)驗(yàn)條件適宜且相同)，測(cè)其重量變化，得到如下的數(shù)據(jù)(“+”表示增加，“-”表示減少)。實(shí)驗(yàn)組別 第1組 第2組 第3組 第4組 第5組 第6組 環(huán)境溫度(℃) 26 28 30 32 34 36 暗處理后有機(jī)物量的變化(mg) -1 -2 -3 -4.2 -5.5 -5 光照后與暗處理后有機(jī)物量的變化 (mg) +3 +4.2 +6.1 +5.8 +5 +3.8 ①暗處理后植物有機(jī)物量的變化原因是__________________________。光照后，有機(jī)物量的增加是由于____________________。
�、谠诒緦�(shí)驗(yàn)所設(shè)定的溫度中，最適合該目的植株生長(zhǎng)的溫度是________℃。
�、壑参矬w的總同化量與凈同化量分別達(dá)到最大值時(shí)的最適溫度不同的原因是：在一定的溫度范圍內(nèi)，光合作用酶與呼吸作用酶的________不同。
[答案] (1)酶解法(纖維素酶和果膠酶處理) 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 耐鹽(抗病不給分) 基因頻率
(2)①細(xì)胞呼吸將有機(jī)物分解為無(wú)機(jī)物 光合作用速率大于呼吸作用速率
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