二、非選擇題(共4小題)
11.請(qǐng)回答下列有關(guān)PCR方面的問題:
(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似(如下圖所示)。圖中引物為單鏈DNA片段,它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。
、?gòu)睦碚撋贤茰y(cè),第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為________。
、谠诘赺_______輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段。
(2)設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列)都不合理(如下圖),請(qǐng)分別說(shuō)明理由。
①第1組:____________,②第2組:__________。
(3)PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定的DNA聚合酶,下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能,這是因?yàn)開_________________。
解析:(1)由原來(lái)的每條母鏈為模板合成的兩個(gè)新DNA分子中,只含有引物A或引物B,而以新合成的子鏈為模板合成的新DNA分子中,兩種引物都含有,故第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為15/16。(3)DNA聚合酶只能在DNA模板存在的條件下,將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上。
答案:(1)(1)①15/16 ②三
(2)①引物I和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效 ②引物Ⅰ自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效
(3)DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上
12.根據(jù)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的相關(guān)知識(shí)及胡蘿卜素的性質(zhì),回答下列問題。
(1)胡蘿卜素是________色的結(jié)晶。從胡蘿卜中提取胡蘿卜素,常用________作為溶劑。
(2)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是________法。用這種方法提取胡蘿卜素的主要步驟是:粉碎、干燥、________、________、________。
(3)在胡蘿卜顆粒的加熱干燥過程中,應(yīng)嚴(yán)格將________和________控制在一定范圍內(nèi),原因是_______________________。
(4)提取的胡蘿卜素可通過________法進(jìn)行鑒定,在鑒定過程中需要用________對(duì)照。
(5)一般情況下,提取胡蘿卜素時(shí),提取效率與原料顆粒的含水量成________比。
解析:胡蘿卜素為橘黃色結(jié)晶,易溶于水不溶性有機(jī)溶劑,萃取后可用紙層析法進(jìn)行鑒定,提取時(shí),原料的含水量越低,提取效率越高。
答案:(1)橘黃 水不溶性有機(jī)溶劑(或有機(jī)溶劑)
(2)萃取 萃取 過濾 濃縮
(3)溫度 時(shí)間 溫度過高和干燥時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致胡蘿卜素分解
(4)紙層析 標(biāo)準(zhǔn)樣品
(5)反
13.下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置,請(qǐng)回答下列問題:
(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分,其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有________功能。我們通常選用豬、牛、羊等動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來(lái),馬上進(jìn)行離心,收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是_______________________ _________________________________________________。
(2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A是____________;乙裝置中,C溶液的作用是____________ 。
(3)甲裝置用于________,目的是____________________________。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫________,是根據(jù)________________分離蛋白質(zhì)的有效方法。
在操作中加樣(下圖)的正確順序是____________。
(4)最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行________。
解析:(1)血紅蛋白能攜帶氧氣,體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有運(yùn)輸功能。實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,檸檬酸鈉具有防止血液凝固的作用。(2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A是磷酸緩沖液;乙裝置中,C溶液的作用是洗脫血紅蛋白。(3)甲裝置用于透析(粗分離),目的是去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫凝膠色譜法,是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。(4)經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。
答案:(1)運(yùn)輸 防止血液凝固
(2)磷酸緩沖液 洗脫血紅蛋白
(3)透析(粗分離) 去除樣品中分子量較小的雜質(zhì) 凝膠色譜法 相對(duì)分子質(zhì)量的大小 ④①②③
(4)純度鑒定
14.DNA在NaCl溶液中的溶解度有兩重性,隨著NaCl溶液濃度的變化而變化。
(1)請(qǐng)?jiān)谙铝袧舛鹊腘aCl溶液中,選出能使DNA析出最徹底的一種和溶解度最高的一種________。
A.0.14 mol/L B.2 mol/L
C.0.15 mol/L D.0.3 mol/L
(2)欲使溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,需要降低NaCl溶液的濃度,最有效的方法是________。
A.加蒸餾水 B.加礦泉水
C.加清水 D.加生理鹽水
(3)DNA不溶于酒精,但細(xì)胞中的某些物質(zhì)卻可以溶于酒精溶液,利用這一原理可以________,可以推測(cè)溶于酒精中的可能有______________。
(4)利用DNA遇________呈藍(lán)色的特性,將該物質(zhì)作為鑒定________的試劑。其實(shí)驗(yàn)過程要點(diǎn)是向放有________的試管中加入4 mL的________混合均勻后,將試管置于________5 min,待試管________,觀察試管中溶液顏色的變化。這個(gè)實(shí)驗(yàn)也說(shuō)明DNA耐________溫,前次溫度有利于________,后次溫度有利于DNA________。
解析:根據(jù)教材中DNA在NaCl溶液中的溶解曲線可知,DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。在2.0 mol/L的NaCl溶液中溶解度最高,溶解度最低時(shí),DNA析出最徹底。染色體由DNA和蛋白質(zhì)組成,采取DNA不溶于酒精的辦法可將DNA和蛋白質(zhì)分開,利用DNA遇二苯胺(沸水浴條件下)變藍(lán)的特性可鑒定DNA。
答案:(1)A、B (2)A (3)去除雜質(zhì) 某些鹽類、蛋白質(zhì)、糖類或其他大分子物質(zhì) (4)二苯胺 DNA DNA 二苯胺試劑 沸水中加熱 冷卻后 高 提高染色的反應(yīng)速度 析出