11.如圖所示為單克隆抗體的制備過程,回答以下問題:
(1)圖中指的是__________________________ ______________________________________________。
(2)實際操作時,要得到所需的雜交瘤細胞,過程至少要經(jīng)歷__________次篩選,一是因為同種細胞會出現(xiàn)自融現(xiàn)象,二是因為每一個B淋巴細胞能分泌__________種抗體,所以篩選出來的雜交瘤細胞還要進行__________檢驗。
(3)圖中指的是__________,如采用該種方式培養(yǎng),需使受體小鼠不產(chǎn)生__________________________________________________。
(4)單克隆抗體與普通抗體相比較,具有__________且可能大量制備等優(yōu)點。
(5)單克隆抗體的主要用途有____________________________。(至少舉出兩例)
解析:(1)制備單克隆抗體應(yīng)先對小鼠注射特異性抗原,然后從其體內(nèi)分離出B淋巴細胞。(2)由于免疫過的B淋巴細胞能產(chǎn)生抗體但不能無限增殖,而骨髓瘤細胞則相反,將兩種細胞混合在一起,在物理、化學(xué)試劑或滅活病毒的作用下相互融合。假如細胞兩兩融合,會出現(xiàn)瘤—瘤細胞、瘤—B細胞以及B—B細胞,先通過特殊培養(yǎng)基篩選出瘤—B細胞,又因分離出來的不一定是特異性抗原刺激而來的B淋巴細胞,所以還要對篩選出來的融合細胞進行抗體陽性檢測,篩選出所需的雜交瘤細胞。(3)雜交瘤細胞既可以在體外培養(yǎng)也可以在體內(nèi)培養(yǎng),但在體內(nèi)培養(yǎng)時,受體小鼠應(yīng)為供體小鼠的組織相容性同系小鼠或無胸腺裸鼠,以避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。(4)單克隆抗體的優(yōu)點:特異性強、靈敏度高,且能大量制備。(5)目前單克隆抗體用到許多方面,比如作為診斷試劑、用于治療疾病和運載藥物等。
答案:(1)注射特異性抗原
(2)兩 1 抗體陽性
(3)體內(nèi)培養(yǎng) 免疫排斥反應(yīng)
(4)特異性強、靈敏度高
(5)作為診斷試劑、用于治療疾病和運載藥物
12.如圖所示為科學(xué)家利用番茄葉細胞和馬鈴薯葉細胞雜交培育“番茄—馬鈴薯”植株的過程,請回答下列問題。
(1)①②過程使用了________酶,以使植物原生質(zhì)體相互分離,此處使用的溶液濃度較大,以保證植物細胞會發(fā)生________;以保護原生質(zhì)體不被破壞;在動物細胞培養(yǎng)技術(shù)中,使細胞分離開來的酶是________。
(2)過程在化學(xué)藥劑________的作用下會發(fā)生細胞融合;動物細胞融合的方法與植物細胞不相同的是________。
(3)過程________屬于脫分化,過程________屬于再分化,細胞發(fā)生分化的根本原因是____________________。
(4)過程的細胞工程技術(shù)是________,其培養(yǎng)時選用的材料通常是分生組織,原因是______________。
(5)植物體細胞雜交的研究在______________方面,取得了巨大突破。
解析:(1)過程使用含有纖維素酶和果膠酶的高濃度溶液處理植物細胞,使植物細胞發(fā)生質(zhì)壁分離,從而保護原生質(zhì)體不被破壞。在動物細胞培養(yǎng)技術(shù)中,使細胞分離開來的酶是胰蛋白酶。(2)過程是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,常用的化學(xué)促融劑是聚乙二醇,而用滅活的病毒促進細胞融合是動物細胞融合特有的方式。(3)過程為脫分化,過程為再分化,愈傷組織在細胞增殖過程中,由于基因選擇性表達形成具有根、莖、葉的植物體。(4)過程為植物組織培養(yǎng)過程。植物組織培養(yǎng)時,由于分生組織細胞分裂旺盛、全能性高,因此常作為組織培養(yǎng)的材料。(5)植物體細胞雜交可以克服不同生物遠緣雜交不親和的障礙,實現(xiàn)不同物種間的基因交流。
答案:(1)纖維素酶和果膠 質(zhì)壁分離 胰蛋白酶
(2)聚乙二醇 可以使用滅活的病毒
(3) 基因的選擇性表達
(4)植物組織培養(yǎng) 全能性高,易培養(yǎng)形成愈傷組織
(5)克服不同生物遠緣雜交不親和的障礙
13.某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。
若要制備雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目為40條),并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞;卮鹣铝袉栴}:
(1)制備融合所需的B淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過________次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細胞的是________小鼠,理由是________________。
(2)細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外,可能還有________________________________,體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是___________________________ _____________________________________________。
(3)雜交瘤細胞中有________個細胞核,染色體數(shù)目最多是________條。
(4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是________________。
解析:本題考查雜交瘤細胞的制備過程和特性。(1)據(jù)圖分析,第四次注射疫苗后,X、Y、Z小鼠的血清抗體效價才有達到16 000以上的,小鼠Y的B淋巴細胞產(chǎn)生抗體效價最高,最適用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外,還有骨髓瘤細胞和B淋巴細胞的自身融合產(chǎn)物;由于細胞融合具有隨機性,故體系中會出現(xiàn)多種類型的融合細胞。(3)雜交瘤細胞形成后,由于核膜具有流動性,小鼠的免疫B淋巴細胞核與其骨髓瘤細胞核會融合形成一個雜交的細胞核,正常情況下融合后的細胞核中的染色體數(shù)目為100條。(4)未融合的B淋巴細胞在不發(fā)生突變的情況下經(jīng)過多次分裂后會衰老死亡,因其不能無限增殖。
答案:(1)4 Y Y小鼠的血清抗體效價最高
(2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞 細胞融合是隨機的,且融合率達不到100%
(3)1 100
(4)不能無限增殖
14.科學(xué)家經(jīng)過長期的實驗獲取了下列圖解所示技術(shù)。請據(jù)此分析并回答下列問題:
(1)寫出以下過程或結(jié)構(gòu)的名稱:B___________;C__________。
(2)A過程________(填“需要”或“不需要”)光照;再分化________(填“需要”或“不需要”)光照。
(3)圖解1所示技術(shù)依據(jù)的原理是________,采用該種技術(shù)的最大優(yōu)點是能夠________。該技術(shù)為植物繁殖創(chuàng)造了新途徑,請列舉其應(yīng)用:________(至少寫出兩種應(yīng)用)。
(4)圖解2所示技術(shù)是________,一般使用________作為誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)C、D的融合,融合后在獲得雜種細胞的容器中還應(yīng)有其他什么細胞?________。(只考慮兩兩融合)
答案:(1)愈傷組織 原生質(zhì)體a
(2)不需要 需要
(3)植物細胞具有全能性 保持優(yōu)良品種的遺傳特性 微型繁殖、作物脫毒、人工種子(答出任意兩項即可)
(4)植物體細胞雜交技術(shù) 聚乙二醇(PEG) 細胞a+細胞a、細胞b+細胞b