二、非選擇題(共4小題)

　　11.生物乙醇是汽油的良好替代品，美國主要以玉米為原料生產(chǎn)燃料乙醇。我國則堅持“不與人爭糧，不與糧爭地”的原則，利用農(nóng)作物廢棄物——秸稈代替糧食作為原料，其主要技術(shù)流程為：

　　秸稈→秸稈顆粒反應(yīng)罐水解壓濾出渣酒精發(fā)酵蒸餾

　　(1)過程加入了微生物，其作用是把秸稈顆粒分解。從土壤中獲取所需微生物的過程為微生物的________，選擇培養(yǎng)基應(yīng)以________為唯一碳源。純化菌種時，將篩選獲得的菌液用________法或________法接種到培養(yǎng)基上。

　　(2)酒精發(fā)酵階段接種的微生物是________，生產(chǎn)酒精要控制的必要條件是__________________________________________________ ______________________。

　　(3)在培養(yǎng)微生物的過程中，對培養(yǎng)基和接種環(huán)采用的滅菌方法分別是________、________。

　　解析：本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用和微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識。(1)從土壤中獲取分解纖維素的微生物的過程稱為微生物的分離。選擇培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源。純化菌種時，將篩選獲得的菌液用稀釋涂布平板法或平板劃線法接種到培養(yǎng)基上。(2)酒精發(fā)酵階段接種的微生物為能無氧呼吸產(chǎn)生酒精的酵母菌。要控制的必要條件是無氧或密封，因為在有氧下，無氧呼吸受到抑制，會影響酒精產(chǎn)量。(3)在培養(yǎng)微生物的過程中，要保證無菌環(huán)境，故對培養(yǎng)基和接種環(huán)采用的滅菌方法分別是高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌。

　　答案：(1)分離　纖維素　稀釋涂布平板　平板劃線

　　(2)酵母菌　無氧或密封

　　(3)高壓蒸汽滅菌　灼燒滅菌

　　12.為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作�；卮鹣铝袉栴}：

　　(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是______________________;然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。

　　(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌，操作時，接種環(huán)通過________滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是__________________。

　　(3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

　　(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________的利用率。

　　解析：本題考查細菌的分離、培養(yǎng)和計數(shù)過程。(1)滅菌不徹底會影響細菌培養(yǎng)的結(jié)果，在培養(yǎng)之前可先對空白平板進行培養(yǎng)，看是否有雜菌生長;3個平板上的菌落數(shù)的平均值為38，則1升水樣中的活菌數(shù)為38×10×100×1 000=3.8×107(個)。(2)接種細菌時，接種環(huán)要進行灼燒滅菌;平板劃線法幾次劃線要首尾相連(注：最后一次劃線不能與第一次劃的起始端相連)，原因是在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著劃線的延伸，菌種數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落，達到稀釋的目的。(3)稀釋涂布平板法是將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，以單個細胞存在(否則一個菌落就不只是代表一個細胞)，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基上。經(jīng)培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，且菌落分布均勻，B圖符合這一特點。(4)液體培養(yǎng)基振蕩時，氧氣會充分混入到液體中，增加溶解氧的含量，同時使細菌與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，以提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

　　答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8×107　(2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落　(3)B　(4)溶解氧　營養(yǎng)物質(zhì)

　　13.下列是有關(guān)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用的問題，請分析回答。

　　(1)如圖是利用________法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步________分散到培養(yǎng)基的表面。圖中右側(cè)手拿的器具稱為________。

　　(2)分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNO3，KH2PO4，NaH2PO4，MgSO4·7H2O，KCl，H2O。若用于培養(yǎng)纖維素分解菌，應(yīng)加入________物質(zhì)，為檢測纖維素分解菌的存在與否，還應(yīng)加入________染料。

　　(3)獲得的菌種如果需要長期保存，可以采用________的方法。

　　答案：(1)平板劃線　稀釋　接種環(huán)

　　(2)纖維素粉　剛果紅

　　(3)甘油管藏

　　14.富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中的最強有力的技術(shù)手段之一。主要是利用不同微生物生命活動特點的不同，制定環(huán)境條件，使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長，從而使其數(shù)量大大增加。如圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物——對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。請分析回答：

　　(1)①→③重復(fù)培養(yǎng)的目的是_____________________ ___________________________________________________。

　　(2)的菌落中大部分是能降解________的微生物。設(shè)置的目的是_______________________________________________________。

　　(3)→⑥采用單細胞挑取法，將所選菌種接種到的培養(yǎng)基中，在操作過程中為防止污染應(yīng)注意的事項是接種環(huán)要________滅菌，待其________后，再挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞，操作完成后需將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒，目的是________________________________________________________________________。

　　(4)如果用這種方法分離土壤中的纖維素分解菌，經(jīng)常用加入了________________的鑒別培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上，纖維素分解菌會因為產(chǎn)生纖維素酶使菌落周圍出現(xiàn)________________________。

　　解析：(1)通過重復(fù)培養(yǎng)可獲得更多的分解對羥基苯甲酸的微生物。(2)通過培養(yǎng)分離獲得的主要是分解對羥基苯甲酸的微生物。(3)接種微生物時要對接種環(huán)進行灼燒滅菌，待接種環(huán)冷卻后再接種，接種完畢后還需對接種環(huán)灼燒以殺滅殘留的微生物。(4)剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當纖維素被纖維素酶分解后，該復(fù)合物就無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。

　　答案：(1)擴大培養(yǎng)(使分解對羥基苯甲酸微生物的比例增高)　(2)對羥基苯甲酸　對照作用　(3)在酒精燈火焰上灼燒　冷卻　殺滅殘留微生物　(4)剛果紅　透明圈