二、非選擇題

　　11.逆轉錄病毒載體是一種表達型質粒，結構如圖所示。圖上的“逆轉錄病毒序列”可以整合到動物細胞的染色體上，不斷地表達其攜帶的目的基因，獲得大量重組逆轉錄病毒。(E、F、H分別為限制酶E、F、H的酶切位點)。

　　(1)逆轉錄的模板是________，原料是________________。

　　(2)在構建重組質粒時，目的基因插入該質粒，此過程需要的酶是限制酶________和________。

　　(3)將重組質粒轉入大腸桿菌前用某種離子處理大腸桿菌使之成為________，才能完成轉化過程。為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌，一般需要用添加________的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

　　(4)獲取大量重組質粒后，可培育轉基因小鼠，將重組質粒導入小鼠受精卵的方法是______________。若目的基因進入細胞后插入到一條染色體DNA上，那么獲得轉基因純合子小鼠的方法是________________。

　　[答案]　(1)RNA　(四種)脫氧核苷酸　(2)F　DNA連接酶　(3)感受態(tài)細胞　抗生素A　(4)顯微注射(法)　轉基因小鼠間相互交配(或雜交)

　　[解析]　(1)逆轉錄是以RNA為模板，合成DNA的過程，原料是4種脫氧核苷酸。(2)構建重組質粒時，需要用同種限制酶切割質粒和目的基因，使之產生相同的黏性末端，因逆轉錄病毒序列在F處，所以用限制酶F進行切割，再用DNA連接酶連接，形成重組質粒。(3)將重組質粒導入到大腸桿菌，一般用Ca2+處理大腸桿菌使之成為感受態(tài)細胞，才能完成轉化過程，質粒上含有抗生素A抗性基因，如果重組質粒導入到受體細胞成功，則受體細胞在含抗生素A的培養(yǎng)基上培養(yǎng)能正常生存。所以為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌，一般需要用添加抗生素A的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(4)將重組質粒導入到小鼠受精卵中的方法是顯微注射法;將目的基因插入到小鼠的一條染色體DNA上，則小鼠為雜合子，要想獲得轉基因純合子小鼠可以讓雜合子小鼠之間，相互交配(或雜交)。

　　12.(2014·焦作模擬)如圖是利用現(xiàn)代生物工程技術治療遺傳性糖尿病(基因缺陷導致胰島B細胞不能正常合成胰島素)的過程圖解，請據圖回答：

　　(1)圖中所涉及的現(xiàn)代生物技術有________________等。(寫3個)

　　(2)圖中①結構表示______________;選擇____________(時期)的卵母細胞去核后作為受體細胞構建重組細胞A。②所示的細胞是__________________。

　　(3)將健康胰島B細胞基因導入②之前要構建______________，這是基因工程的核心，除含目的基因外，還必須含有______________等。

　　(4)重組細胞B在一定的細胞分化誘導劑作用下，可以定向分化形成具有正常胰島B細胞功能的胰島樣細胞，其根本原因是________________________________________。培養(yǎng)重組細胞B的培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分包括__________________(至少寫兩種)。

　　(5)圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點是______________________。

　　[答案]　(1)細胞核移植、轉基因技術、動物細胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)

　　(2)細胞核　MⅡ中期(或減數第二次分裂中期)　內細胞團細胞(或胚胎干細胞)

　　(3)基因表達載體　啟動子、終止子、標記基因

　　(4)基因的選擇性表達　糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、血清或血漿

　　(5)沒有免疫排斥反應