3.呈色反應(yīng)

　　1)異羥肟酸鐵反應(yīng)(識(shí)別內(nèi)酯)紅色

　　香豆素在堿性條件下開(kāi)環(huán)，與鹽酸羥胺縮合生成異羥肟酸，在酸性條件下，再與Fe3+絡(luò)合顯紅。

　　2)Gibb’s 反應(yīng)&Emerson反應(yīng)判斷C6是否被取代

　　條件：有游離酚羥基，且其對(duì)位無(wú)取代者呈陽(yáng)性

　　Gibb’s 反應(yīng)顯藍(lán)色;Emerson反應(yīng)顯紅色

　　4. 香豆素類(lèi)的提�。簤A溶酸沉法

　　香豆素類(lèi)的分離：柱色譜分離一般采用硅膠為吸附劑，洗脫系統(tǒng)為水-甲醇(正相色譜)

　　(一) 香豆素的波譜學(xué)特性

　　1.紫外光譜UV下顯藍(lán)色熒光。

　　1)C7位導(dǎo)入-OH熒光增強(qiáng)

　　2)-OH醚化后熒光減弱 eg:有OCH3

　　3)7-羥基香豆素在C8位導(dǎo)入羥基，熒光消失

　　4)呋喃香豆素?zé)晒廨^弱

　　2.1H-NMR

　　1)C3，C6，C8的H在較高場(chǎng);C4，C5，C7的H在較低場(chǎng) 此處是H譜，不是C的電負(fù)性

　　2)C3，C4未取代：C3，6.2d;C4，8.0d，偶合常數(shù)較大J34=9.5Hz(香豆素)

　　C3，C4取代后呈單峰

　　鑒別：天然香豆素通常C3，C4通常沒(méi)有取代(dd峰)

　　3)C7-OR取代：C3d，C6m，C8m移向高場(chǎng)

　　4)C5，C7二氧代：C6尖峰d，J=2Hz;C8與C4遠(yuǎn)程偶合鈍峰d, J=2Hz

　　5)C7-OR&C6: C5,7.2s; C8,6.8s 遠(yuǎn)程偶合

　　C7-OR&C8：C5,7.2d; C6,6.8d;J5，J6=9Hz

　　3.NOE效應(yīng)

　　對(duì)分子中空間相距較近的兩核之一進(jìn)行照射，使之達(dá)到躍遷飽和狀態(tài)，此時(shí)記錄另一核的核磁共振峰，可發(fā)現(xiàn)較無(wú)此照射時(shí)，譜峰強(qiáng)度增強(qiáng)。

　　照射某個(gè)氫核，與其空間相近的氫核產(chǎn)生的NOE效應(yīng)有時(shí)不是特別明顯，或者相鄰的氫核與其它氫信號(hào)有重疊現(xiàn)象，則可測(cè)試NOE差光譜。

　　NOE差光譜：計(jì)算機(jī)進(jìn)行兩譜相減，一樣的峰型相減為0，不一樣的會(huì)出現(xiàn)負(fù)譜，觀察現(xiàn)象來(lái)判斷兩種結(jié)構(gòu)中的哪一種。

　　4.13C-NMR

　　當(dāng)-OR取代時(shí)，連接的碳+30ppm;鄰位碳-13ppm;對(duì)位碳-8ppm