第四節(jié) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法的驗證

　　熟悉藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證中各項指標(biāo)的定義和考察方法。

　　一般常用的分析效能評價指標(biāo)包括：精密度、準(zhǔn)確度、檢測限、定量限、專屬性、線性與范圍、重現(xiàn)性、耐用性等;測定法的效能指標(biāo)可評價分析測定方法，也可作為建立新的測定方法的實驗研究依據(jù)。

　　1.準(zhǔn)確度是指測得結(jié)果與真實值接近的程度，表示分析方法測量的正確性。

　　由于“真實值”無法準(zhǔn)確知道，因此，通常采用回收率試驗來表示。

　　制劑的含量測定時，采用在空白輔料中加入原料藥對照品的方法作回收試驗及計算RSD。

　　回收率=(平均測定值M -空白值B)/ 加入量A×100%

　　回收率的RSD一般應(yīng)為2%以內(nèi)。

　　2.精密度系指用該法測定同一勻質(zhì)樣品的一組測量值彼此符合的程度。它們越接近就越精密。在藥物分析中，常用標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD或S); 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)，也稱變異系數(shù)(CV)表示。

　　3.專屬性是指在樣品介質(zhì)中有其他組分共存時該分析方法對供試物質(zhì)準(zhǔn)確而專屬的測定能力。

　　4.檢測限(LOD)是指分析方法能夠從背景信號中區(qū)分出藥物時，所需樣品中藥物的最低濃度，無需定量測定。

　　LOD是一種限度檢驗效能指標(biāo)，它既反映方法與儀器的靈敏度和噪音的大小，也表明樣品經(jīng)處理后空白(本底)值的高低。要根據(jù)采用的方法來確定檢測限。當(dāng)用儀器分析方法時，可用已知濃度的樣品與空白試驗對照，記錄測得的被測藥物信號強(qiáng)度S與噪音(或背景信號)強(qiáng)度N，以能達(dá)到S/N=2或S/N=3時的樣品最低藥濃為LOD;也可通過多次空白試驗，求得其背景響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)差，將三倍空白標(biāo)準(zhǔn)差(即3δ空或3S空)作為檢測限的估計值。如用非儀器分析方法時，即通過已知濃度的樣品分析來確定可檢出的最低水平作為檢測限。

　　5.定量限 (LOQ)是指在保證具有一定可靠性(一定準(zhǔn)確度和精密度)的前提下，分析方法能夠測定出的樣品中藥物的最低濃度。

　　它反映了分析方法測定低藥物濃度樣品時具有的可靠性。它與上述的檢測限的差別在于：定量限要定量測定某一藥物在樣品介質(zhì)中的最低濃度，且定量限規(guī)定的最低濃度應(yīng)該符合一定的精密度和準(zhǔn)確度的要求。確定定量限的方法也因所用方法不同而異。當(dāng)用非儀器分析方法時，與上述檢測限的確定方法相同;如用儀器分析方法時，則往往將多次空白試驗測得的背景響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)差(即空白標(biāo)準(zhǔn)差)乘以10，作為定量限的估計值，繼之，再通過分析適當(dāng)數(shù)量已知接近定量限或以定量限制備的樣品來驗證。

　　6.線性與范圍

　　分析方法的線性是在給定范圍內(nèi)獲取與樣品中供試物濃度成正比的試驗結(jié)果的能力。換句話說，就是供試物濃度的變化與試驗結(jié)果(或測得的響應(yīng)信號)成線性關(guān)系。

　　所謂線性范圍是指利用一種方法取得精密度、準(zhǔn)確度均符合要求的試驗結(jié)果，而且成線性的供試物濃度的變化范圍，對于含量測定要求一般濃度上限為樣品最高濃度的120%，下限為樣品最低濃度的80% (但應(yīng)高于LOQ)。

　　7.耐用性 是指利用相同的方法在各種正常實驗條件下對同一樣品進(jìn)行分析所得結(jié)果的重現(xiàn)程度。

　　所謂各種正常實驗條件，包括不同的實驗室、不同的分析人員、不同的儀器、不同批號的試劑、不同的測試耗用時間、不同的分析溫度、不同的測定日期等等。分析方法重現(xiàn)性的測定是通過在不同實驗室由不同的實驗者(操作和環(huán)境條件雖有差別但仍在規(guī)定的分析參數(shù)內(nèi))對同一樣品的分別測試而獲得的。

　　評價一種分析方法的效能，一般根據(jù)方法的使用對象區(qū)別。有以下四種情況：

　　A.用于原料藥中主要組分或制劑中有效組分含量測定的方法：除了檢測限和定量限二項指標(biāo)外，對精密度、準(zhǔn)確度、選擇性、線性與范圍、耐用性等均應(yīng)有所要求;

　　B.用于原料藥中雜質(zhì)測定或制劑中降解產(chǎn)物測定的方法又可分為兩種：

　�、儆糜诤�量測定，除檢測限不必要求外，對準(zhǔn)確度、選擇性、線性與范圍、定量限、耐用性等均應(yīng)有所要求;

　�、谟糜谙薅葯z查，只對檢測限、專屬性和耐用性三項指標(biāo)有所要求，其余均無需要求。

　　C.用于溶出度測定的方法及藥物釋放度測定的方法，只有精密度和耐用性有所要求，其余項目均不作要求